Estudio del estrés oxidativo en la polineuropatía diabética

Peripheral polyneuropathy (PNP) is the most common presentation of diabetic neuropathy and responsible of the diabetic foot, with a large impact on quality of life and health care costs. Its prevalence ranges from 30 to 60%, depending on the diagnostic procedures used and the population studied, with a progressive increase in the natural history of diabetes and poor efficacy of treatments available today to slow its progression. The underlying pathophysiological mechanisms in the development of PNP in type 2 diabetic patient (T2DM) are multifactorial and not well known. The so-called classic factors: metabolic control, age, duration of diabetes and coexistence of other microvascular complications, are insufficient to explain its pathogenesis. No other potential biological risk factors are well known. In this sense, elevated levels of homocysteine and oxidative stress (OS) have been related to the presence and progression of PNP. Future studies could give us strategies for early detection and effective treatment. However, considering the information available it has not been demonstrated and clearly association of OS and PNP, nor a relation between the presence of OS and degree of neuropathy. Therefore, our hypothesis is: the presence and degree of polyneuropathy in T2DM should be associated with a higher degree of oxidative stress and elevated plasma homocysteine levels. To test this hypothesis, our aims are: 1. To study the relation of classical factors such as age, duration of diabetes, metabolic control and lipid pattern with the presence and severity of PNP in T2DM. 2. To determine the association between the presence and severity of diabetic PNP with plasma homocysteine levels. 3. To analyze whether OS markers (glutathione system and MDA) are associated with the presence and degree of PNP in a large cohort of T2DM. Our study is a case-control study, including 405 type 2 diabetic patients (169 women), consecutively selected. The association of clinical, biochemical and plasma homocysteine levels with the presence of PNP evaluated by Semmes Weinstein monofilament test and the degree of PNP assessed by Neuropathy Disability Score (NDS) was evaluated. In a subgroup of 58 patients adjusted for age, gender, duration of diabetes and ankle-brachial index (case-control nested), the association of markers of oxidative stress (MDA and glutathione system: GSH, GSSG and ratio GSH/GSSG), with the degree of PNP was assessed by NDS scale. Measurement of plasma homocysteine and OS markers was performed with standardized method (ELISA and HPLC, respectively). The analysis of results showed: 1. There is a statistically significant positive association between the presence and degree of PNP in type 2 diabetics with age, duration of diabetes, impaired renal function, worsening of glycemic control (HbA1c) and other microvascular complications. 2. There is a statistically significant and independent correlation between plasma homocysteine levels and the presence and degree of PNP. 3. Finally, we have found in a subgroup of T2DM a significant association of the presence of PNP and a decreased of GSH / GSSG ratio, reflecting an increase in oxidative stress. There are pathophysiological mechanisms that could explain these results and would provide new preventive and / or therapeutic alternatives in diabetic PNP.La polineuropatía periférica (PNP), la forma de presentación más frecuente de la neuropatía diabética, es una de las complicaciones microvasculares clave en el curso de la diabetes, por su relación con el desarrollo del llamado pie diabético, con una gran repercusión sobre la calidad de vida y coste sanitario. Su prevalencia oscila entre el 30 al 60 %, dependiendo de los procedimientos diagnósticos utilizados y de la población estudiada, con un progresivo incremento en la historia natural de la diabetes y una escasa eficacia de los tratamientos disponibles en la actualidad para frenar su progresión. Los mecanismos fisiopatológicos subyacentes en el desarrollo de la PNP en el paciente con diabetes tipo 2 (DM2) son multifactoriales y no bien conocidos. Los llamados factores clásicos: control metabólico, edad, duración de la diabetes y coexistencia de otras complicaciones microvasculares, son insuficientes para explicar su patogenia. No se conocen bien otros potenciales factores de riesgo biológicos. En este sentido, niveles elevados de homocisteína y de estrés oxidativo (EO) se han relacionado con la presencia y progresión de la PNP, y su estudio podría aportarnos futuras armas para su detección precoz y tratamiento eficaz. Sin embargo, considerando la información disponible en la actualidad, no ha podido demostrarse de forma concluyente su asociación con la PNP, así como tampoco se ha demostrado una relación entre la presencia de EO y el grado de neuropatía. Por tanto, nuestra hipótesis de trabajo es: la presencia y grado de polineuropatía en diabéticos tipo 2 debe estar asociada a un mayor grado de estrés oxidativo y una elevación de los niveles plasmáticos de homocisteína. Para evaluar dicha hipótesis, se plantearon los siguientes objetivos: 1. Estudiar la relación de factores clásicos como la edad, duración de la diabetes, control metabólico y patrón lipídico con la presencia y gravedad de PNP en diabéticos tipo 2. 2. Determinar la asociación entre la presencia y gravedad de PNP diabética con los niveles de homocisteína plasmática. 3. Analizar si marcadores de EO: sistema glutatión y malondialdehido (MDA), se asocian con la presencia y grado de PNP en una amplia cohorte de diabéticos tipo 2. Se trata de un estudio casos-control, donde se determinó en 405 pacientes con DM2 (169 mujeres), seleccionados de forma consecutiva, la asociación de parámetros clínicos, bioquímicos y niveles de homocisteína plasmática con la presencia de PNP evaluada con la prueba del monofilamento Semmes-Weinstein y con el grado de PNP evaluada mediante la escala Neuropathy Disability Score (NDS). Así mismo, se estudió en un subgrupo de 58 pacientes de la corte completa ajustados por edad, género, tiempo de evolución de la diabetes e índice tobillo-brazo, en un estudio de casos control anidado, la asociación de marcadores de EO (MDA y sistema glutatión: GSH, GSSG y cociente GSH/GSSG), con el grado de PNP evaluada mediante escala NDS. La medición de la homocisteína plasmática y marcadores de EO se realizó con método estandarizado (enzimoinmunoanálisis y HPLC, respectivamente). Tras analizar los resultados observamos que: 1. Existe una asociación positiva, estadísticamente significativa, entre la presencia y grado de PNP en los diabéticos tipo 2 con la edad, duración de la diabetes, deterioro de la función renal, empeoramiento del control glucémico y otras complicaciones microvasculares. 2. Existe una correlación, estadísticamente significativa e independiente, de las concentraciones de homocisteína plasmática con la presencia y grado de PNP. 3. Por último, hemos encontrado en un subgrupo de pacientes una asociación estadísticamente significativa entre la presencia de PNP y una disminución de la ratio GSH/GSSG, reflejo de un aumento del estrés oxidativo. Existen mecanismos fisiopatológicos que podrían explicar estos resultados y aportarían nuevas alternativas preventivas y/o terapéuticas de la PNP en el paciente diabético