Etude génomique du choriocarcinome gestationnel par aCGH 244K

Le choriocarcinome (CC) gestationnel, tumeur métastasiante, est la complication majeure de la môle hydatiforme (MH), qui est une maladie gestationnelle trophoblastique. Les MH complètes sont diploïdes et pour 10 d entre elles que nous avons étudiées par CGH métaphasique, nous n avons observé aucun gain ou perte chromosomique. Par CGH métaphasique, puis par CGH-array 244K à haute résolution, nous avons étudié 11 CC post-môlaires, dont le diagnostic avait été vérifié par histopathologie, et 3 lignées cellulaires (BeWo, JAR et JEG). L étiologie androgénique et l absence de contamination de l ADN tumoral par l ADN maternel l ont été par l analyse de marqueurs microsatellites. Selon les résultats de l aCGH, les tumeurs primaires présentent de simples remaniements chromosomiques ou des profils normaux. Les lignées montrent des anomalies plus complexes et variées. Des remaniements chromosomiques ainsi détectés ont été vérifiés par FISH. Les désordres chromosomiques du 1, 11, 14, 17, 18, 19, 20, X touchent à la fois les tumeurs primaires et les lignées cellulaires, tandis que ceux du 5, 7, 8, 9, 10, 12, 16 concernent uniquement les lignées cellulaires. Des régions minimales critiques (MCR) ont été définies, et des gènes candidats susceptibles de jouer un rôle dans l'oncogenèse du CC, ont été recherchés et l'expression de certains vérifiée par immunohistochimie. De nombreux clusters de miRNA et de gènes soumis à empreinte parentale ont été observés dans ces MCR. Dans le processus de cancérisation des môles en CC, des dérèglements géniques conséquences d anomalies chromosomiques se superposeraient aux déséquilibres initiaux d expression des gènes soumis à empreinte.Gestational Choriocarcinoma, a metastasing tumor, is the major complication of hydatidiform moles (HM) which belong to trophoblastic diseases. The complete HM are diploid and for ten of them, studied by metaphasic CGH, no chromosomal abnormalities were observed. Eleven CC had their diagnosis confirmed by histopathology, and the androgenic etiology by a microsatellite marker analysis, that also confirmed the absence of contamination of tumor DNA by maternal DNA. The samples of DNA from these CC and three cell lines, BeWo, JAR, and JEG were studied by metaphasic CGH and by high resolution 244K aCGH. FISH verifications of chromosomal abnormalities were performed. According to aCGH analysis, the de novo CC exhibited simple chromosomal rearrangements or normal profiles. The cell lines showed various and complex chromosomal aberrations. Chromosomes 1, 11, 14, 17, 18, 19, 20, X Copy Number Anomalies (CNA) were observed in tumors and cell lines, while 5, 7, 8, 9, 10, 12, 16 CNAs were only found in cell lines. Minimal Critical Regions were defined, that allowed to list the genes that were potentially implicated. Testing the expression of several genes by Immunohistochemistry showed a correlation with CNA. Among the MCR, unusually high numbers of microRNA clusters and imprinted genes were observed. Gene disorders caused by abnormal chromosomal imbalances could be superimposed to the initial abnormal expression of imprinted genesPARIS-BIUSJ-Biologie recherche (751052107) / SudocSudocFranceF