Ocena równowagi limfocytów Th1/Th2 oraz ekspresji receptorów dla lipopolisacharydu u chorych na astmę

Introduction: An increase in the number of asthma patients which has recently been observed depends on their place of residence and their occupation. This suggests that both external factors and genetic predispositions affect the development of the disease. The contact with bacterial lypopolysaccharide (LPS) may suppress the development of asthma among rural inhabitants. The mechanism of LPS effect most probably consists in the activation of macrophages and granulocytes by TLR4 and CD14 receptors for the production of cytokines, which affect Th1/Th2 balance. The objective of the study was the evaluation of CD14 and TLR4 expression on mononuclear cells and the analysis of Th1/Th2 balance in peripheral blood among asthma patients. Material and methods: The study group covered 22 patients with bronchial asthma (mean age 45 ± 15), and was conducted by the method of flow cytometry with the use of fluorochrome-labelled monoclonal antibodies. CD14 and TLR expression was assessed in peripheral blood monocytes. Th1/Th2 balance was determined by the measurement of intracellular IL-2, IFN-γ, IL-4 and IL-10 expression in T-helper cells after culture with the stimulation of cytokine production. Results: A negative correlation was noted between TLR4 expression and the percentage of Th2 lymphocytes, while a positive correlation was observed between expression of TLR4 and percentage of Th1 cells. No relationship was found between CD14 expression on monocytes and the percentage of Th1 and Th2 lymphocytes. Conclusions: An increased percentage of lymphocytes with TLR4 expression is associated with the change in Th1/Th2 balance in favour of Th1 lymphocytes in asthma patients.Wstęp: Obserwowany obecnie wzrost zachorowań na astmę jest zależny od miejsca zamieszkania chorych i wykonywanej przez nich pracy. Sugeruje to, że na występowanie choroby mają wpływ zarówno czynniki zewnętrzne, jak również predyspozycje genetyczne. Kontakt z lipopolisacharydem (LPS) bakteryjnym może hamować rozwój astmy u osób z regionów rolniczych. Prawdopodobny mechanizm działania LPS polega na aktywowaniu makrofagów i granulocytów przez receptory TLR4 i CD14 do wytwarzania cytokin, mających wpływ na równowagę Th1/Th2. Celem pracy była ocena ekspresji CD14 oraz TLR4 na komórkach jednojądrzastych oraz analiza równowagi Th1/Th2 we krwi obwodowej u chorych na astmę. Materiał i metody: Grupę badaną stanowiło 22 chorych (wiek średni: 45 ± 15 lat) na astmę oskrzelową. Badanie wykonano metodą cytometrii przepływowej za pomocą przeciwciał monoklonalnych znakowanych fluorochromami. Ekspresję CD14 i TLR4 oceniono na wyizolowanych z krwi obwodowej komórkach jednojądrzastych. Równowagę Th1/Th2 określono przez wykonanie pomiaru wewnątrzkomórkowej ekspresji IL-2, IFN-γ, IL-4 i IL-10 w limfocytach T pomocniczych, w hodowlach prowadzonych ze stymulatorami wytwarzania cytokin. Wyniki: Odsetek limfocytów z ekspresją TLR4 korelował istotnie ujemnie z odsetkiem limfocytów Th2 i znamiennie dodatnio z odsetkiem limfocytów Th1. Nie stwierdzono zależności między ekspresją CD14 na monacytach a odsetkami limfocytów Th1 i Th2. Wnioski: Zwiększony odsetek limfocytów z ekspresją TLR4 ma związek z przesunięciem równowagi Th1/Th2 na korzyść limfocytów Th1 u pacjentów z astmą