Μελέτη της δραστικότητας γλυκολυτικών ενζύμων κατά την εξαλλαγή κυττάρων με το ογκογονίδιο T24-H-RAS

The aim of the study was to eludicate the role of the H-RAS ongogene in the regulation of glycolytic enzymes, since glycolysis is thought to be the main energy source of tumor cells. We develooped for this reason rat fibroblast and epithelial cell lines in which transcription of the exogenous human T24-H-RAS gene is regulated by addition of IPTG in the culture medium. We found that overexpression of H-RAS leads to activation of phosphoglycerate kinase, enolase and pyruvate kinase in fobroblasts but not in epithelial cells. This activation, however, did not result in alteration of the total glycolytic rate. We propose that these activations concern non glycolytic function of the above enzymes, as have been recently described.Στόχος της παρούσας διατριβής ήταν η μελέτη της επίδρασης του ογκογονιδίου H-RAS, το οποίο βρίσκεται σε πολλούς τύπους καρκίνου του ανθρώπου, στη γλυκόλυση, η οποία είναι το βασικό ενεργειακό μονοπάτι των καρκινικών κυττάρων. Κατασκευάστηκαν κυτταρικές σειρές ινοβλαστών και επιθηλιακών κυττάρων αρουραίου στις οποίες έχουμε τη δυνατότητα να ρυθμίζουμε εξωγενώς την έκφραση του γονιδίου Τ24-Η-RAS που εισήχθη με επιμόλυνση στα κύτταρα αυτά. Βρέθηκε ότι υπερέκφραση του H-RAS προκαλεί ενεργοποίηση των ενζύμων φωσφογλυκερινική κινάση, ενολάση και πυροσταφιλική κινάση στους ινοβλάστες αλλά όχι στα επιθηλιακά κύτταρα. Η ενεργοποίηση αυτή δε, δεν μεταφράζεται σε αύξηση του συνολικού ρυθμού γλυκόλυσης, αλλά μάλλον αφορά μη γλυκολυτικές λειτουργίες των αναφερθέντων ενζύμων