A high molecular weight RNA-protein complex is involved in \(\it trans\)-splicing of chloroplast mRNA

Das dreigeteilte plastidäre \(\it psaA\)-Gen der Grünalge \(\textit {Chlamydomonas reinhardtii}\) kodiert für ein Apoprotein von Photosystem I. Für den Reifungsprozess der \(\it psaA\)-mRNA sind zwei \(\it trans\)-Spleißreaktionen notwendig, wobei nukleär-kodierte Proteine beteiligt sind. Rat2 und Raa4 wurden als Köder für TAP-Experimente verwendet, wodurch Raa1, Raa3, Raa4, Rat2 und weitere Proteine als Kernkomponenten eines Spleißkomplexes identifiziert wurden. Funktionelle Komplementationsstudien ermöglichten die Identifizierung einer uncharakterisierten Komplexkomponente als \(\it trans\)-Spleißfaktor Raa8. Es konnte eine direkte Protein-Protein-Interaktion von Rat2 mit anderen Spleißfaktoren gezeigt werden. Weitere Analysen ergaben, dass Rat2 und Raa4 Teil eines 1,9 MDa Ribonukleoprotein-Komplexes sind. Durch TAP mit \(\it tscA\)-Deletionsstämmen wurden verschiedene Subkomplexe sowie mit Raa4 in einem \(\it tscA\)-Deletionsstamm, Komponenten der 2. \(\it trans\)-Spleißreaktion identifiziert, welches auf eine Verbindung beider Komplexe deutet