Development of electroanalytical methods for detection of cholesterol, 7-dehydrocholesterol and cholecalciferol

Látky steroidní povahy jsou nedílnou součástí všech organismů. Patří mezi ně například žlučové kyseliny, steroidní hormony nebo některé vitaminy. Cholesterol je lipofilní složkou buněčných membrán. Jeho ukládání do cév v podobě nízkodenzitního lipoproteinu (LDL) má za následek závažné zdravotní komplikace jako je ateroskleróza a další. 7-dehydrocholesterol je prekurzorem cholesterolu a dalšího steroidu studovaného v této práci, cholekalciferolu (vitamin D3). Zvýšené množství 7-dehydrocholesterolu v důsledku deficitu 7-dehydrocholesterol reduktázy je příčinou rozvoje Smith- Lemli-Opitzova syndromu (SLOS), autosomálně recesivního genetického onemocnění vedoucího k různým stupňům mentální a fyzické retardace. Elektroanalytické metody se k detekci steroidních sloučenin využívají okrajově, jelikož redoxní aktivita řady steroidů, které neobsahují žádné nebo pouze izolované dvojné vazby na steroidním skeletu, je omezená. V rámci této disertační práce byly vyvíjeny voltametrické metody a metody založené na průtokové injekční analýze s multipulsní amperometrickou detekcí a amperometrickou detekcí při konstantním potenciálu pro detekci cholesterolu, 7-dehydrocholesterolu a cholekalciferolu. Měření byla prováděna na pracovních diskových elektrodách, a to borem dopované diamantové elektrodě, elektrodě ze...Steroidival substances are an integral part of the human organism, such as bile acids, steroid hormones, vitamins. The most important sterol in whole organism is cholesterol, which is cornerstone of the all cell membranes. It is involved in important processes in the body, but its storage in blood vessels in the formo f low-density lipoprotein (LDL) is crucial of reason serious health diseases as atherosclerosis, myocardial infarction and others. 7-dehydrocholesterol is a precursor of cholesterol and another sterol compound studied by me, cholekalciferol, also known as a vitamin D3. Deficiency of 7-dehydrocholesterol reductase is the main indicatior of the possible genesis of Smith-Lemli-Opitz syndrome. One of the goals of this thesis was developed a suitable electrochemical method to facilitate the diagnosis of this syndrome from plasma and amniotic fluid in the prenatal and postnatal phases of pregnancy. Within the framework of this thesis were developer electrochemical methods in a batch and flow arrangement for detection of the above-mentioned sterols, namely cholesterol, 7-dehydrocholesterol and cholekalciferol. It was wokered in the medium contain perchloric acid or its salt sodium perchlorate in acetonitrile as supporting electrolyte. It was worked in the wide range of working disc...Department of Analytical ChemistryKatedra analytické chemieFaculty of SciencePřírodovědecká fakult