Caracterización molecular de aislados de Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) utilizando mecA-PCR y PCR-RFLP

With the objective of characterizing methicillin-resistant Staphylococcus aureus that circulates in our country, a total of 88 positive methicillin-resistant Staphylococccus aureus (MRSA) were obtained from the national epidemiological survey library of Instituto Conmemorativo Gorgas de Estudios de la Salud del Laboratorio Central de Referencia en Salud Pública,  Republic of Panama, We amplified mecA and demonstrated its presence in 100% of our isolates of the gene mecA. The characterizacion of the isolates was performed by RFLP-PCR of the coa, spa, HVR genes and digestion with Haell.  Then amplificated three genes (coa, spa and HVR). The aisolates were grouped into five categories based on the genes for which amplification was obtained. Restriction digestion of a mixture of the three amplicons produced 19 banding patterns; these patterns were reproducible and comparative to previous studies.  Category 1 with amplification in the three genes (24 isolates) generated 19 different banding patterns. Category 2 with amplification in the genes (coa and spa) grouped 25 isolates with 17 different patterns. Category 3 with amplification in (coa and HVR) grouped 10 isolates with 6 patterns.  Category 4 with amplification only for coa with 11 isolates and 7 patterns. Category 5, only one isolate with amplification for HVR generated only one type of pattern. The band patterns obtained are reproducible and comparable to other previous studies. Our results suggest that RFLP-PCR is a practical, easy, rapid and discriminant screening methodology for epidemiological surveillance of infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA).Se estudiaron 88 aislados clínicos de Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) recuperados por la red de vigilancia bacteriológica del Instituto Conmemorativo Gorgas de Estudios de la Salud del Laboratorio Central de Referencia en Salud Pública (ICGES-LCRSP) obtenidos en la República de Panamá con el objetivo de caracterizar molecularmente los aislados que circulan en nuestro país. Se amplificó el gen mecA y se demostró su presencia en el 100% de los aislados. La caracterización de los aislados se realizó mediante RFLP-PCR de los genes coa, spa, HVR y digestión con HaeII. Los aislados se agruparon en 5 categorías con base en los genes para los cuales se obtuvo amplificación. La categoría 1 con amplificación en los tres genes (24 aislamientos) generó 19 patrones de  bandas diferentes. La categoría 2 con amplificación en los genes (coa y spa) agrupó 25 aislamientos con 17 patrones diferentes. La categoría 3 con amplificación en (coa y HVR) agrupó 10 aislamientos con 6 patrones.  La categoría 4 con amplificación solo para coa con 11 aislamientos y 7 patrones. La categoría 5, sólo un aislamiento con amplificación para HVR generó solo un tipo de patrón. Los patrones de banda obtenidos  son reproducibles y comparables con estudios previos. Nuestros resultados demuestran que RFLP-PCR es una metodología de escrutinio útil, fácil, rápida y discriminante para realizar vigilancia epidemiológica de infecciones causadas por el SARM