Application of modern analytical methods in clinical research

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Training Workplace Department of Analytical Chemistry Doctoral Degree Program Bioanalytical Methods Candidate Mgr. Andrea Vernerová Supervisor Assoc. Prof. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Advisor MUDr. Ondřej Sobotka, Ph.D. Title of Doctoral Thesis Application of modern analytical methods in clinical research The dissertation thesis, composed as a compilation of five publications, is dealing with the development, optimization and validation of chromatographic methods and extraction procedures for the determination of early activation of the immune system biomarkers (neopterin, kynurenine, and tryptophan) in saliva and gingival crevicular fluid in oncological patients and patients with periodontal diseases. Furthermore, the potential of the use of Clark's sensor to determine the correct function of platelets by measuring mitochondrial respiration and its application in clinical research is under investigation. This work was based on cooperation with several clinical departments of the University Hospital Hradec Králové and Olomouc, and Oroboros Instruments (Innsbruck, Austria). The theoretical part of the thesis is focused on detail description of the individual analytes, their clinical significance, used biological matrices and their...Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Školicí pracoviště Katedra analytické chemie Doktorský studijní program Bioanalytické metody Kandidátka / kandidát Mgr. Andrea Vernerová Školitelka / školitel doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Konzultantka / konzultant MUDr. Ondřej Sobotka, Ph.D. Název disertační práce Využití moderních analytických metod v klinickém výzkumu Disertační práce, komponovaná jako soubor pěti publikací, se zabývá vývojem, optimalizací a validací chromatografických metod a extrakčních postupů pro stanovení časných biomarkerů aktivace imunitního systému (neopterinu, kynureninu a tryptofanu) ve slinách a gingivální tekutině u onkologických pacientů a pacientů s parodontálním onemocněním. Dále je v práci zkoumán potenciál využití Clarkova senzoru pro zjištění správné funkce trombocytů pomocí měření mitochondriální respirace a jeho aplikace v klinickém výzkumu. Práce vznikla na základě spolupráce s několika klinickými pracovišti FN Hradec Králové a Olomouc a Oroboros Instruments (Innsbruck, Rakousko). V teoretické části práce jsou blíže popsány jednotlivé analyty, jejich klinický význam, využité biologické matrice a jejich úprava před analýzou. Dále jsou zde diskutovány separační metody a metody detekce, které byly použity v rámci této práce. Vlastní...Department of Analytical ChemistryKatedra analytické chemieFarmaceutická fakulta v Hradci KrálovéFaculty of Pharmacy in Hradec Králov