Usage of HPLC and UHPLC-MS/MS techniques for clinical research

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Mgr. Kateřina Kučerová Školitel: doc. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Konzultant: doc. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Název disertační práce: Využití technik HPLC a UHPLC - MS/MS pro klinický výzkum Disertační práce se zabývá vývojem, optimalizací a validací chromatografických metod a extrakčních postupů. První metoda byla vyvíjena pro stanovení léčiva ze skupiny inhibitorů protonové pumpy omeprazolu a druhá pro stanovení retinolu jako nového potencionálního biomarkeru poškození ledvin. V teoretické části práce jsou blíže popsány jednotlivé analyty, jejich klinický význam, možnosti stanovení a charakteristiky matric, ve kterých byly cílové analyty stanovovány. Dále je zde diskutována úprava vzorku před analýzou a rozebrány validační normy vztahující se k chromatografickým metodám používaným jak ve farmaceutické analýze, tak v bioanalýze. V experimentální části je blíže uveden vývoj, optimalizace a validace UHPLC metod a jejich následné využití. Ve farmaceuticko-analytické části práce je popsáno stanovení omeprazolu v nových suspenzních přípravcích zahrnující využití UHPLC systému, kolon s částicemi s porézním povrchem a velmi jednoduchou úpravu vzorku. V bioanalytické části práce je popsáno...Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Mgr. Kateřina Kučerová Supervisor: assoc. prof. PharmDr. Ludmila Matysová, Ph.D. Consultant: assoc. prof. RNDr. Lenka Kujovská Krčmová, Ph.D. Title of Dissertation Thesis: Usage of HPLC and UHPLC - MS/MS techniques for clinical research The dissertation thesis is dealing with the extraction techniques and with development, optimization and validation of chromatographic methods for the determination of omeprazol which is drug from the group of proton pump inhibitors, and retinol as a new potential biomarker of kidney damage. The theoretical part of the thesis is focused on detailed description of the individual analytes, their clinical significance, options of determination and the matrix in which the target analytes were determined. Furthermore, the preparation of the sample before the analysis is discussed and validation recommendations related to chromatographic methods used in both pharmaceutical analysis and bioanalysis are also mentioned. In the experimental part the development, optimization and validation of UHPLC methods and their subsequent use are described in detail. The pharmaceutical-analytical part of the work describes the determination of omeprazole in new suspension preparations,...Katedra analytické chemieDepartment of Analytical ChemistryFarmaceutická fakulta v Hradci KrálovéFaculty of Pharmacy in Hradec Králov