Gene engineering methods in Leishmania research

Gene engineering methods are now increasingly used in the study of leishmania. These modern DNA technologies make it possible to manipulate with the genome of organisms, allowing it to be altered and repaired. The most important methods include CRISPR/Cas9, RNA interference (RNAi), dimerizable Cre recombinase (DiCre), plasmid shuffle and gene tagging. The choice of method depends on whether essential or non-essential genes are being studied as well as the reason of the study. These methods investigate leishmania using a reverse genetics approach that allows the phenotype to be studied. This work summarizes the current knowledge on the use of gene engineering methods in Leishmania, the necessary modifications of the procedures and discusses their limitations and advantages.Při studiu leishmanií současné době stále více využívá metod genového inženýrství. Tyto moderní DNA technologie umožňují zásah do genomu organismů a přesnou manipulaci umožňující jeho změny a opravy. Mezi nejdůležitější metody patří CRISPR/Cas9, RNA imerizovatelná Cre rekombináza (DiCre), plasmid shuffle a gene tagging. Volba metody závisí na tom, zda studujeme esenciální nebo neesenciální geny, případně co je cílem studie. Díky těmto metodám můžeme zkoumat leishmanie přístupem reverzní genetiky, která umožňuje studovat fenotyp. Tato práce shrnuje dosavadní poznatky o využití metod genového inženýrství a současně diskutuje jejich limitace, výhody a nezbytné modifikace postupů u leishmanií.Department of ParasitologyKatedra parazitologieFaculty of SciencePřírodovědecká fakult