Розробка методів контролю якості перспективного антиконвульсанта

In the previous studies, NUPh scientists proved that the search of potential anticonvulsants among derivatives of 1,3,4-thiadiazole is very perspective [1-3]. At the medicinal chemistry department of NUPh N-(5-ethyl-[1,3,4]-thiadiazole-2-yl)-2-nitrobenzamide was synthesized. This substance demonstrated high anticonvulsive activity on pentylentetrazole model of seizure compared to classic drug «Depakin». The substance is patented and proposed for further preclinical studies. One of the most important stages in the introduction of a new medicinal product or substance into medical practice is the development of quality control techniques.The aim. The aim of this work was to develop methods of identification, determination of impurities and quantitative determination of N- (5-ethyl- [1,3,4] -thiadiazole-2-yl)-2-nitrobenzamide for further application in standardization of the substance.Methods. Chromatographically pure sample of N- (5-ethyl- [1,3,4] -thiadiazole-2-yl) -2-nitrobenzamide, methods of IR, UV and 1H NMR spectroscopy.Results. The physical-chemical properties and spectral characteristics of N-(5-ethyl-[1,3,4]-thiadiazole-2-yl)-2-nitrobenzamide were studied, and chemical identification methods were proposed. The optimal conditions for the determination of the impurities by the method of thin-layer chromatography using the method of internal normalization are selected. The assay for N- (5-ethyl- [1,3,4] -thiadiazol-2-yl) -2-nitrobenzamide was carried out by absorption spectrophotometry in the alcohol solution at the wavelength of 282 nm with the absorption index 631. For application of methods such validation characteristics as robustness, linearity, correctness, stability of analytical solutions, precision, convergence, reproducibility, calculation of uncertainty of samples preparation were studied.Conclusions. The methods of identification of N- (5-ethyl- [1,3,4] -thiadiazol-2-yl) -2-nitrobenzamide with the use of chemical reactions and spectral methods of analysis - IR and UV and 1H NMR spectroscopy have been developed. To determine the concomitant impurities in the substance, the TLC method is recommended. Specific and nonspecific impurities were determined. The method of quantitative determination of substance by absorption spectrophotometry method in the ultraviolet region by the method of specific absorption index have been developedПредыдущими исследованиями ученых НФАУ доказана перспективность поиска потенциальных противосудорожных средств в ряду производных 1,3,4-тиадиазола [1-3]. На кафедре медицинской химии НФаУ синтезирована субстанция N- (5-этил [1,3,4] -тиадиазол-2-ил) -2-нитробензамид, которая в условиях эксперимента показала высокую противосудорожную активность на коразоловой модели судорог по сравнению с классическим антиконвульсантом - «Депакином». Соединение запатентовано и предложено для дальнейших доклинических исследований. Одним из важнейших этапов внедрения нового лекарственного средства или субстанции в медицинскую практику является разработка методик контроля качества.Цель. Целью данной работы была разработка методик идентификации, определения примесей и количественного определения N- (5-этил [1,3,4] -тиадиазол-2-ил) -2-нитробензамида с целью дальнейшего применения в стандартизации субстанции.Методы. Хроматографически чистый образец N- (5-этил [1,3,4] -тиадиазол-2-ил) -2-нитробензамида, методы ИК-, УФ- и 1Н ЯМР спектроскопии.Результаты. Изучены физико-химические свойства и спектральные характеристики N- (5-этил [1,3,4] -тиадиазол-2-ил) -2-нитробензамида, предложены химические методы идентификации. Подобраны оптимальные условия определения сопутствующих примесей методом тонкослойной хроматографии с использованием метода внутренней нормализации. Анализ N- (5-этил- [1,3,4] -тиадиазол-2-ил) -2-нитробензамида проводили методом абсорбционной спектрофотометрии в этанольном растворе при длине волны 282 нм с показателем поглощения 631. Для применения метода были изучены такие валидационные характеристики, как устойчивость, линейность, корректность, стабильность аналитических решений, точность, сходимость, воспроизводимость, расчет неопределенности подготовки образцов.Выводы. Разработаны методы идентификации N- (5-етил- [1,3,4] -тиадиазол-2-ил) -2-нитробензамида с использованием химических реакций и спектральных методов анализа - ИК и УФ и 1Н ЯМР -спектроскопии. Для определения сопутствующих примесей в субстанции рекомендован метод ТСХ. Определены регламентированные специфические и неспецифические примеси. Разработана методика количественного определения субстанции методом абсорбционной спектрофотометрии в ультрафиолетовой области методом удельного показателя поглощенияПопередніми дослідженнями вчених НФАУ доведена перспективність пошуку потенційних антиконвульсантів в ряду похідних 1,3,4-тіадіазолу[1-3]. На кафедрі медичної хімії НФаУ синтезована сполука N-(5-етил-[1,3,4]-тіадіазол-2-іл)-2-нітробензамід, яка в умовах експерименту показала високу протисудомну активність на коразоловій моделі судом у порівнянні з класичним антиконвульсантом – «Депакіном». Сполука запатентована та запропонована для подальших доклінічних досліджень. Одним з найважливіших етапів впровадження нового лікарського засобу або субстанції в медичну практику є розробка методик контролю якості.Мета. Метою даної роботи була розробка методик ідентифікації, визначення домішок та кількісного визначення N-(5-етил-[1,3,4]-тіадіазол-2-іл)-2-нітробензаміду з метою подальшого застосування в стандартизації субстанції.Методи. Хроматографічно чистий зразок N-(5-етил-[1,3,4]-тіадіазол-2-іл)-2-нітробензаміду, методи ІЧ-, УФ- та 1Н ЯМР спектроскопії.Результати. Вивчено фізико-хімічні властивості і спектральні характеристики N-(5-етил-[1,3,4]-тіадіазол-2-іл)-2-нітробензаміду, запропоновано хімічні методи ідентифікації. Підібрано оптимальні умови визначення супутніх домішок методом тонкошарової хроматографії з використанням методу внутрішньої нормалізації. Аналіз N- (5-етил-[1,3,4] -тіадіазол-2-іл) -2-нітробензаміда проводили методом абсорбційної спектрофотометрії в етанольному розчині при довжині хвилі 282 нм з показником поглинання 631. Для застосування методу були вивчені такі валідаційні характеристики, як стійкість, лінійність, коректність, стабільність аналітичних рішень, точність, збіжність, відтворюваність, розрахунок невизначеності підготовки зразків.Висновки. Розроблено методи ідентифікації N- (5-етіл- [1,3,4] -тіадіазол-2-іл) -2-нітробензаміду з використанням хімічних реакцій і спектральних методів аналізу - ІЧ і УФ та 1Н ЯМР -спектроскопії. Для визначення супутніх домішок в субстанції рекомендований метод ТШХ. Визначено регламентовані специфічні і неспецифічні домішки. Розроблено методику кількісного визначення субстанції методом абсорбційної спектрофотометрії в ультрафіолетовій ділянці методом питомого показника поглинанн