Investigation of effect of ischemia/reperfusion on astrocyte culture

Traumų metu, pagrindinis tikslas yra atkurti pažeistą kraujotaką tokiu būdu grąžinant maistinių medžiagų ir deguonies patekimą į smegenis. Mažas deguonies kiekis smegenyse pirmiausia veikia mitochondrijas, kurios atsakingos už energijos gamybą ląstelėse, o taip pat svarbios ląstelių žūčiai ar išgyvenamumui. Išeminės būklės mitochondrijų Ca2+ įsisavinimas lemia MPTP (mitochondrijų nespecifinio laidumo poros) susidarymą, dėl kurio atsiranda organėlių sutrikimai ir proapoptotinių baltymų išsiskyrimas, skatinantys ląstelių žūtį. Yra įrodymų, kad MPTP yra susijęs su išemine širdies trauma, tačiau duomenų apie MPTP vaidmenį išeminiam smegenų sužalojimui vis dar trūksta. Apibendrinant gautus rezultatus pastebėta, kad astrocitų šulinėliuose su kalceino dažu fluorescencijos intensyvumas išlieka nepakitęs iki 15minutės. Reikšmingi skirtumai pastebėti eksperimentuose su rotenonu (0,05 μM;1 μM) ir CAM + jonamicinas ir CAM. Pastebėta, kad rotenonas (1 μM) fluorescencijos intensyvumą išlaikė ilgiau lyginant su rotenonu(0,05 μM). Lyginant ekperimente su metforminu gautus rezultatus, pastebėtas statistiškai reikšmingas skirtumas tarp kalceino ir metformino (2mM; 3mM). Iš gautų rezultatų su fenforminu (50mM; 100mM) matome, kad fluorescencijos intensyvumas sumažėjo statistiškai reikšmingai lyginant su šulinėliu papildytu CAM, o lyginant su CAM ir jonamicinu – reikšmingų rezultatų nera. CsA (3μM;5μM) fluorescencijos intensyvumas išliko nepakitęs visą eksperimento eigą, nes lyginant su šulinėliu papildytu tik CAM, nematomi reikšmingi skirtumai. Apibendrinant matoma, kad CsA (5μM) koncentracija parodo statistiškai reikšmingus rezultatus stebint fluorescencijos intensyvumą jau nuo 5 eksperimento minutės.During injuries, the main goal is to restore damaged blood circulation thus restoring nutrients and oxygen to the brain. Low levels of oxygen in the brain primarily affect the mitochondria, which are responsible for energy production in cells, and are also important for cell death or survival. The uptake of ischemic mitochondrial Ca2 + leads to the formation of MPTP (mitochondrial non-specific conductivity pair), which results in organ disorders and the secretion of proapoptotic proteins that promote cell death. There is evidence that MPTP is associated with ischemic heart injury, but data on the role of MPTP in ischemic brain injury are still lacking. Summarizing the obtained results, it was observed that the fluorescence intensity in calcein-stained astrocyte wells remained unchanged for up to 15 min. Significant differences were observed in experiments with rotenone (0.05 ;M; 1 μM) and CAM + jonamycin and CAM. Rotenone (1 μM) was observed to retain fluorescence intensity longer compared to rotenone (0.05 μM). Comparing the results obtained in the experiment with metformin, a statistically significant difference was observed between calcein and metformin (2 mM; 3 mM). From the obtained results with phenformin (50 mM; 100 mM) we see that the fluorescence intensity decreased statistically significantly compared to well-supplemented CAM, and compared to CAM and jonamycin - no significant results. The fluorescence intensity of CsA (3μM; 5μM) remained unchanged throughout the experiment, as no significant differences were seen compared to the well supplemented with CAM alone. In summary, it can be seen that the concentration of CsA (5μM) shows statistically significant results in monitoring the fluorescence intensity from 5 minutes of the experiment.Gamtos mokslų fakultetasBiologijos katedr