Evaluation of the cytobrush method for the detection of subclinical endometritis and the effect of a subclinically inflamed uterus on reproductive performance in dairy cows

Deckblatt \- Impressum persönlicher Dank Inhaltsverzeichnis 5 Abkürzungsverzeichnis 9 1 Einleitung 11 2 Literaturübersicht 13 3 Material und Methoden 35 4 Ergebnisse 49 4.1 Feldstudie 49 4.2 Reproduzierbarkeit 73 5 Diskussion 93 6 Zusammenfassung 109 7 Summary 111 8 Literaturverzeichnis 113 9 Anhang 150 DanksagungBeim Milchrind stellt die chronische Endometritis in der postpartalen Phase eine häufig auftretende Erkrankung dar. In der tierärztlichen Praxis angewandte Diagnosemethoden sind die Palpation vom Rektum her und die vaginoskopische Untersuchung. Ziel dieser Studie war es eine zytologische Methode (Cytobrush) als Diagnostikum für subklinische Endometritiden zu evaluieren. In einer Feldstudie wurde die Auswirkung dieser subklinischen Entzündung auf die Fruchtbarkeitsleistung der Tiere ermittelt. Auf einem Milchviehbetrieb im Land Brandenburg wurden zwischen dem 21. und 27. Tag nach der Kalbung Puerperalkontrollen (PK 1) durchgeführt. Bei 407 nach rektaler Palpation klinisch unauffälligen Tieren erfolgte anschließend eine Zellentnahme aus dem Uterus mit der Cytobrush-Methode. In den zytologischen Präparaten wurde der Anteil neutrophiler Granulozyten (PMN) bestimmt. Es erfolgte eine Einteilung der Tiere in zwei Gruppen anhand des Anteils an PMN im zytologischen Präparat. Tiere mit weniger als 5% PMN wurden als gesund, Tiere mit mindestens 5% PMN als an einer subklinischen Endometritis erkrankt eingestuft. Ein Therapieversuch wurde nicht unternommen. Nach vierzehn Tagen wurde bei 306 klinisch gesunden Kühen die Cytobrush-Untersuchung wiederholt. Zur PK 1 waren 58,7% der Kühe zytologisch gesund, während 41,3% der Tiere eine subklinische Endometritis aufwiesen. Bei der Nachuntersuchung dieser unbehandelten Kühe wiesen nur noch 16,4% der Tiere mindestens 5% PMN im zytologischen Präparat auf, 83,6% der Tiere zeigten weniger als 5% PMN. Zur Bestimmung der Fruchtbarkeitsparameter wurden 375 Kühe herangezogen, die auch zur Nachuntersuchung unbehandelt blieben. In der Gruppe der erkrankten Tiere war der Anteil besamter Tiere statistisch signifikant geringer als in der Gruppe der gesunden Tiere (p<0,05). Die Rast- und Güstzeiten unterschieden sich nicht wesentlich. Die Brunstnutzungsrate war in beiden Gruppen gleich hoch. In der Gruppe der gesunden Kühe war der Erstbesamungserfolg etwas höher als in der Gruppe der erkrankten Tiere, während die Konzeptionsrate dagegen in der Gruppe der erkrankten Tiere höher war. Für beide Indizes konnte jedoch kein signifikanter Unterschied zwischen den Gruppen festgestellt werden. Der Anteil tragender Kühe in der Gruppe der gesunden Tiere war statistisch signifikant höher als in der Klasse der erkrankten Tiere. Die Cytobrush- Untersuchung ist eine effektive und praktikable Methode der Zellgewinnung aus dem Uterus klinisch unauffälliger Kühe und eignet sich zur Diagnostik subklinischer Endometritiden am 21.-27. Tag p.p. Ob eine Behandlung den fruchtbarkeitsreduzierenden Effekt einer subklinischen Endzündung mindert oder aufhebt, bedarf weiterer Untersuchungen.Chronic endometritis is a common disorder in post partum dairy cows. It causes depressed reproductive performance in the current lactation and economic losses. In practice, rectal palpation and/or vaginoscopy are generally used methods for the diagnosis of endometritis. The objective of this study was to evaluate a cytological method (cytobrush) as a diagnostic tool for the detection of subclinical endometritis in dairy cows. The effect of an inflammation in the uterus on reproductive performance was quantified. Holstein cows were examined by rectal palpation 21 to 27 days in milk (post partum check 1). Vaginal discharge was regarded as a sign for clinical endometritis. Cytological samples were obtained from the uterus of 407 clinically healthy cows by a modified cytobrush method (Kasimanickam et al. 1999). Cytological assessment determined the percentage of polymorphonuclear neutrophils (PMN) by counting an average of 300 cells. Two classes were defined. Cows with less than 5% PMN in the cytological sample were regarded as healthy cows while cows with more than 5% PMN were considered to have a subclinical endometritis. None of the cows was treated. Two weeks later 306 clinically healthy cows were re-examined by cytobrush method. At the first post partum check 41,3% of the clinically healthy cows were diagnosed having a subclinical endometritis. Fourteen days later only 16,4% showed more than 5% PMN whereas 83,6% showed less than 5% PMN. Reproductive performance was determined for 375 untreated cows. Number of cows inseminated was significantly lower for cows with subclinical endometritis compared to healthy cows (p