Polimorfismos no gene receptor de vitamina D (VDR como fatores de risco para a Síndrome de Down)

Contém tabelas, gráficos e ilustraçõesINTRODUÇÃO: A Síndrome de Down (SD) é a principal causa genética de retardo mental, com uma incidência estimada em 1 em 1000 nascimentos. Na maioria dos casos com SD (95%) ocorre uma trissomia do cromossomo 21, resultante da não disjunção, principalmente na meiose materna. Polimorfismos em genes da via do ácido fólico foram associados a um risco aumentado para a não disjunção. Os níveis de ácido fólico e vitamina D são influenciados pela radiacão UV; a deficiência destas vitaminas tem sido relacionada a diversos distúrbios. HIPÓTESE CIENTÍFICA: Polimorfismos no gene receptor de vitamina D (VDR) são fatores de risco para a ocorrência da síndrome de Down. OBJETIVO: Analisar a associação entre variantes alélicas FokI (rs2228570), TaqI (rs731236), BsmI (rs1544410) e Cdx2 (rs11568820) no gene VDR e a não disjunção em mães de crianças com SD. Para as análises moleculares o DNA genômico foi obtido a partir de células bucais. METODOLOGIA: A genotipagem dos polimorfismos FokI (rs2228570), BsmI (rs1544410) e Cdx2 (rs11568820 ) foram realizadas pela técnica de PCR em Tempo Real para discriminação alélica (TaqMan); para o polimorfismo TaqI (rs731236), foi realizada pelo método da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e Polimorfismo de Comprimento de Fragmento de Restrição (RFLP). A análise estatística dos dados moleculares seguiu o método caso-controle. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Foram coletadas amostras de saliva de 125 mães de criancas com SD e 223 mães controles (CT). O alelo de menor frequência (T) de FokI foi encontrado em 0,28 em casos e 0,35 em CT; para o alelo C de TaqI a frequência foi 0,36 em SD e 0,31 em CT, para o alelo A de BsmI foi de 0,34 em SD e em 0,32 CT; e para Cdx2 o valor do alelo G foi de 0,38 em SD e 0,44 em CT. Para todos os SNPs a amostra foi ajustada para a co-variável idade com mães <40 anos e as frequências não diferiram, exceto para FokI. Houve diferença nas frequências genotípicas e alélicas (p:0,04 e p:0,01, respectivamente) para FokI, e depois do ajuste da idade, houve associação com tendência a proteção do alelo T (TT vs CC: OR 0,30, IC 0,10-0,90; p=0,03; TT ou CT vs CC:OR 0,57, IC 0,34-0,96; p=0,03; T vs C: OR 0,60, IC 0,40-0,90; p=0,01). Esses SNPS foram analisados combinadamente para averiguar uma possível associação na presença de mais de um polimorfismo VDR e o aumento de risco de ocorrência de SD, mas não foram encontrados valores significativos. No estudo familiar, além das mães, as crianças SD e CT foram genotipadas e, através do teste de desequilíbrio de transmissão (TDT), verificou-se um desvio na transmissão dos alelos de FokI (p:<0,001) e BsmI (p:0,001). As diferentes frequências de polimorfismos no gene VDR nas populações, a deficiência de vitamina D, a exposição a raios UV, e a latitude são fatores que podem influenciar nos resultados encontrados. Mais estudos são necessários para melhor compreensão do papel destes polimorfismos na ocorrência da sindrome de Down.INTRODUCTION: Down Syndrome (DS) is the main genetic cause of mental retardation, with an estimated incidence of 1 in 1000 births. The majority of trisomy 21 cases (95%) are due to a maternal meiotic error (non-disjunction). Folic acid pathway gene polymorphisms were associated with an increased risk for non-disjunction. Folic acid and vitamin D levels are influenced by UV radiation. The deficiency of these vitamins has been related to several disorders. SCIENTIFIC HYPOTHESIS: Polymorphisms in vitamin D receptor gene (VDR) are risk factors for the occurrence of Down syndrome. OBJECTIVE: To analyze the association between allelic variants FokI(rs2228570), TaqI (rs731236), BsmI (rs1544410) and Cdx2 (rs 11568820) in VDR gene and the occurrence of Down syndrome. In molecular analyzes the genomic DNA was obtained from oral cells. MATERIALS AND METHODS: Genotyping of the polymorphisms FokI (rs2228570), BsmI (rs1544410) and Cdx2 (rs11568820) were performed by the Real Time PCR technique for allelic discrimination (TaqMan); TaqI polymorphism (rs731236), was performed by the Polymerase Chain Reaction (PCR) and Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) method. Statistical analysis of molecular data followed the case-control method. RESULTS: Samples of saliva were collected from 125 mothers of children with SD and 223 control mothers (CT). The lowest frequency allele (T) of FokI was 0.28 in cases and 0.35 in CT; for the C allele of TaqI the frequency was 0.36 in SD and 0.31 in CT, for the A allele of BsmI was 0.34 in SD and in 0.32 CT; and for Cdx2 the G allele value was 0.38 in SD and 0.44 in CT. The sample was adjusted for the co-variable age with mothers