Estudos sobre parasitismo gastrointestinal e pulmonar em javalis e veados caçados em montarias do centro e sul de Portugal Continental

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaAs infeções parasitárias são comuns nos ungulados silvestres, contudo a presença de coinfecções entre helmintes e outros agentes pode potenciar a sua patogenicidade. Neste estudo, foi investigada a presença de parasitas gastrointestinais e pulmonares em javalis e veados provenientes de área epidemiológica de risco de tuberculose bovina (TB), de forma a compreender se os endoparasitas contribuem para a manutenção da infeção por Mycobacterium bovis. Recorreu-se à colheita de 124 amostras fecais de animais caçados na sub-região do Baixo Alentejo (n=73), Beira Interior Sul (n=7) e Lezíria do Tejo (n=44), sendo que as duas primeiras sub-regiões pertencem à área epidemiológica de risco de TB em caça maior. As amostras foram armazenadas à temperatura de refrigeração (5ºC) ou de congelação (-18ºC) e foram efetuados testes coprológicos de flutuação de Willis, sedimentação simples, McMaster, coprocultura em copo para isolamento de larvas no 3º estádio (L3) de nemátodes estrongilídeos gastrointestinais (EGI), método de Baermann para pesquisa de larvas no 1º estádio (L1) de nemátodes pulmonares e esfregaço fecal para pesquisa de Cryptosporidium spp. e Giardia sp. Recorreu-se à análise de risco entre os parasitas encontrados (variáveis dependentes) e a conservação da amostra, sub-região, idade e sexo do animal (variáveis independentes). Nos testes coprológicos verificou-se que as amostras refrigeradas se encontravam mais parasitadas do que as congeladas e como a conservação da amostra era um fator de risco, recorreu-se à separação das amostras em amostras refrigeradas e amostras congeladas. Na grande maioria dos animais detetou-se infeção parasitária (78,3%) em 83 animais, sendo a proporção maior nos javalis do que nos veados. Nas amostras refrigeradas de javali (n=43) observou-se a presença de EGI (97,7%), Cryptosporidium spp. (69,8%), Metastrongylus spp. (34,9%), coccídias (30,2%), Trichuris suis (14,0%), Fasciola hepatica (7,0%), Ascarídeos (4,7%) e os quistos de Giardia sp. não foram observados. Através da coprocultura observou-se L3 de Oesophagostomum spp. Com significado estatístico, animais do Baixo Alentejo têm uma probabilidade de excreção de oocistos de coccídias 3 vezes maior do que os da Lezíria do Tejo. A probabilidade de infeção por coccídias e de excreção de oocistos de Cryptosporidium nos jovens é 6,7 e 13,5 vezes maior do que em adultos, respetivamente. As amostras congeladas de javali eram de animais infetados e não infetados com TB, em que 62,5% encontravam-se parasitados. Ainda nas amostras congeladas de animais não infetados com TB encontrou-se 3 tipos de helmintes: EGI (25%), Fasciola hepatica (6,3%) e Ascaris suum (12,5%); e nas amostras congeladas de animais infetados com TB observou-se 4 tipos de helmintes: EGI (41,7%), Metastrongylus spp. (33,3%), família Eimeriidae (20,8%) e Balantidium spp. (4,2%). Nas amostras refrigeradas de veado (n=34), os ovos de EGI foram os mais assinalados (73,5%), seguindo-se outros parasitas com uma presença muito inferior, Eimeria spp. (17,6%), Strongyloides sp. (14,7%), oocistos de Cryptosporidium spp. (11,8%) e ainda 5,9% para Moniezia benedeni, Trichuris spp. e Fasciola hepatica. Os quistos de Giardia spp. não foram observados no veado. Através do método de Baermann em fezes de veados observaram-se larvas L1 de Elaphostrongylus sp. (26,5%) e de Varestrongylus sp. (11,8%). Na coprocultura observou-se L3 de Ostertagia spp. e Oesophagostomum spp.. Com significado estatístico, os veados positivos a TB tinham 5 e 16,5 vezes mais probabilidade de excreção de ovos de estrongilídeos e de oocistos de Cryptosporidium spp., respetivamente, podendo revelar que os animais infetados com TB têm um sistema imunitário debilitado. Com este estudo, foi possivel concluir que os parasitas têm um papel importante na manutenção da tuberculose bovina em javalis e veados.ABSTRACT - Studies on gastrointestinal and pulmonary parasitism in wild boar and red deer hunted in the center and couth of Portugal Mainland - Parasitic infections are common in wild ungulates, although the presence of coinfections between helminths and other agents, may potentiate their pathogenicity. In this study, we investigated the presence of gastrointestinal and pulmonary parasites in wild boars and red deer from epidemiological area of bovine tuberculosis (TB) risk, in order to understand if the endoparasites contribute to the maintenance of Mycobacterium bovis infection. The 124 Fecal samples were collected from animals hunted from Baixo Alentejo sub-region (n=73), Beira Interior Sul (n=7) and Lezíria do Tejo (n=44), being the first two belong to the epidemiological area of TB risk in hunting game. The samples were stored at refrigeration (5ºC) or freezing temperature (-18ºC) and coprological tests of Willis flotation, simple sedimentation, McMaster, faecal cultures for isolation of larvae in 3rd stage (L3) from gastrointestinal strongyles (GIS), Baermann method for larvae in the 1st stage (L1) research of pulmonary nematodes and fecal smear for Cryptosporidium spp. Risk analysis was used, with a significance value of 0.05 and a confidence interval of 0.95, among the parasites found (dependent variables) and the conservation of the sample, sub-region, age and sex of the animal (independent variables). In the coprological tests it was found that the refrigerated samples were more parasitized than those that were frozen, and as the conservation of sample was a risk factor, we separate the samples in refrigerated samples and frozen samples. In the majority of the animals parasitic infection was detected (78.3%; n=83), the proportion being higher in wild boars than in red deer. In refrigerated samples of boar (n=43) was observed the presence of GIS (97.7%), Cryptosporidium spp. (69.8%), Metastrongylus spp. (34.9%), coccidia (30.2%), Trichuris suis (14.0%), Fasciola hepatica (7.0%), Ascarídeos (4,7%) and cysts of Giardia sp. weren’t found. Through faecal cultures larvae L3 of Oesophagostomum spp. were observed. With statistical relevance, Baixo Alentejo’s animals have a probability of excretion of coccidian oocysts 3 times greater than those of the Lezíria do Tejo. The probability of coccidial infection and excretion of Cryptosporidium oocysts in younger animals is 6.67 and 13.5 times higher than in adults, respectively. The frozen wild boar samples were from infected and non-TB infected animals, where 62,5% were parasitized. In the frozen samples of non-TB infected animals 3 types of helminths were found: GIS (25%), Fasciola hepatica (6.3%) and Ascaris suum (12.5%); and in the frozen samples of TB infected animals, 4 types of helminths were observed: GIS (41.7%), Metastrongylus spp. (33.3%), Eimeriidae family (20.8%) and Balantidium spp. (4.2%). In the refrigerated samples of red deer (n=34), the strongyle-type eggs were the most found (73.5%), followed by other parasites with a much lower presence, Eimeria (17.6%), Strongyloides sp. (14.7%), Cryptosporidium oocysts (11.8%) and also 5.9% for Moniezia benedeni, Trichuris spp.and Fasciola hepatica. The Giardia cysts weren’t found. Through Baermann’s method in deer faeces, L1 larvae of Elaphostrongylus sp. (26.5%) and Varestrongylus (11.8%) were observed. In the faecal culture was observed L3 of Ostertagia spp. And Oesophagostomum spp.. Statistically significant, TB positive deer had 5 and 16.5 times probability to excrete strongyle eggs and Cryptosporidium spp. oocysts, respectively; which may reveal that animals infected with TB have a weakened immune system. With this study, it was possible to conclude that parasites play an important role in the maintenance of tuberculosis in wild boars and red deers.N/