Produção de antígeno e separação da proteína P28 através de microfiltragem seriada para sorodiagnóstico da artrite encefalite caprina.

Resumo: O vírus da Artrite Encefalite Caprina (CAEV) é um lentivírus que causa uma enfermidade crônica que não possui tratamento ou vacinação como ferramenta de controle, sendo responsável por perdas econômicas significativas em todo mundo. O diagnóstico é principalmente baseado em exames sorológicos, onde os antígenos utilizados para o diagnóstico são compostos basicamente pelas proteínas estruturais p28 e gp135. Este estudo teve como objetivo produzir um antígeno (Ag) a partir de cultura de células de Membrana Sinovial Caprina (MSC) infectadas com CAEV, pela técnica de microfiltração seriada, substituindo a ultracentrifugação em colchão de sacarose ( Ag UCCS) para utilização em um ELISA indireto (ELISA-i). Amostras de 188 soros caprinos, que previamente foram testados pelo Western Blot (WB) com Ag UCCS, foram submetidos à análise pelo ELISA-i com o novo antígeno produzido, que mostrou uma concordância de 92% em relação ao antígeno UCCS. A sensibilidade e especificidade do ELISA em relação ao WB foram de 95,65% e 88,5% respectivamente. A nova técnica criada a partir de microfiltrações, mostrou-se efetiva para o diagnóstico sorológico de anticorpos para CAEV em comparação ao antígeno ultracentrifugado, apresentando-se, portanto, como uma alternativa viável para produção de antígeno purificado de lentivírus de pequenos ruminantes. Abstract: The caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) is a lentivirus which causes a chronic character disease that does not have treatment or vaccination as a control tool, being responsable for significant economical losses all over the world. The diagnosis is mainly based on serological exams, in which the antigens (Ag) used for diagnosis are basically composed by p28 and gp135 structural proteins. This study aimed to produce an antigen (Ag) from the culture of goat synovial membrane cells (MSC) infected by CAEV by serial microfiltering technique replacing ultracentrifugation in sacarosis Mattress (UCCS) for the indirect diagnosis ELISA tests (i-ELISA). Samples of 188 serum from goats, previously examined by Western Blot (WB) with Ag UCCS were submitted to analysis by i-ELISA with new antigen produced, demonstrating an accordance of 92% in relation to UCCS antigen. The specificity and sensitivity relating to WB were of 95.65% and 88.5% respectively. The new technique created from the microfiltering showed itself effective to the serological antibodies diagnosis of CAEV comparing to the ultracentrifuged one, presenting itself, therefore, as to viable alternative for purified antigen of lentivirus of small ruminants.Dissertação (Mestrado Acadêmico em Ciências Veterinária) - Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza. Orientadora: Maria Fátima da Silva Teixeira; Co-orientadora: Alice Andrioli Pinheiro, Embrapa Caprinos e Ovinos (CNPC)