A proteína induzida por estresse do tipo 1 (STI-1) atua sobre a expressão de SOX10 durante a diferenciação inicial das células da crista neural

TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Biológicas. Biologia.A Proteína induzida por estresse do tipo I (STI-1) é uma co-chaperona que pode ser secretada e atuar como um fator solúvel. Nosso grupo foi o primeiro a mostrar que STI-1 estimula a diferenciação das células da crista neural truncal (CNT) para neurônios e melanócitos, em detrimento da diferenciação para células gliais. STI-1 mostrou ter efeito sobre a diferenciação das células da CNT apenas nas fases iniciais de cultivo. Para compreender melhor os mecanismos moleculares associados a esse efeito, nós avaliamos a influência de STI-1 sobre a expressão de Sox10, considerado o principal regulador da diferenciação inicial das células da crista neural. Células da CNT foram cultivadas durante 48 horas em meio controle e em meio básico suplementado com STI-1 (10 ng/ml). Após esse período foi realizada imunocitoquímica para Sox10 e em seguida, os níveis de expressão de Sox10 foram analisados pela intensidade de fluorescência emitida por cada célula. As células da população controle e tratada com STI-1 foram divididas em três grupos de expressão de Sox10: células com expressão de Sox10 fraca, mediana e forte. Também foi analisada a influência de STI-1 sobre a proliferação celular através de dois experimentos: contagem direta de células que deixaram o tubo neural durante as primeiras 24 horas de cultivo e análise da incorporação de BrdU durante a última hora de cultivo. Os resultados obtidos mostraram que o tratamento com STI-1 altera o padrão populacional de expressão de Sox10 nas células da CNT e, ainda, induz alterações na expressão de Sox10 em grupos distintos, levando a um aumento do número de células com expressão mediana de Sox10 em detrimento de células com expressão fraca. Além disso, não foram observadas alterações na proliferação celular durante o tratamento com STI-1, quando comparado à condição controle. Este dado indica que STI-1 atua diretamente sobre o controle da expressão de Sox10. Este trabalho é o primeiro a fazer uma análise de expressão de Sox10 em células da CNT de forma individualizada, considerando a heterogeneidade da população. Tal analise permitiu concluir que a STI-1 promove o aumento da expressão de Sox10 nas células da CNT, nas fases iniciais de diferenciação