Immunologic characterization of plasma membranes from the renal proximal tubule of the dog

Immunologic characterization of plasma membranes from the renal proximal tubule of the dog. Plasma membrane fractions from the brush border (BBM) and antiluminal (ALM) surfaces of the dog's renal proximal tubule cell were separated using free-flow electrophoresis. Rabbits immunized with BBM rapidly produced antibody, but rabbits immunized with ALM did not respond. Indirect immunofluorescence and immunoferritin studies showed that the antibody reacts with the brush border of the proximal tubules in the normal kidney of the adult dog. It also reacts with the surface membranes of certain other absorptive and secretory epithelia, such as gall bladder, small intestine, epididymis, and lacrimal gland. The antibody has affinity for the membrane maltase without affecting its catalytic activity, but does not appear to have affinity for the membrane alkaline phosphatase or the high affinity binding site for phlorizin present in the BBM. Polyacrylamide electrophoresis of solubilized BBM showed ∼37 protein bands and four glycoproteins. We conclude that the proximal tubule cell is immunologically polarized with respect to the distribution of antigenic proteins, and that the BBM is highly antigenic. The antigenic components appear to be high molecular weight glycoproteins present in the glycocalyx.Caractérisation immunologique des membranes plasmiques du tube proximal du rein de chien. Des membranes plasmiques de la bordure en brosse (BBM) et de la face anti-luminale (ALM) des cellules tubulaires proximales du rein de chien ont été séparées au moyen de l'électrophorèse en flux libre. Des lapins immunisés avec BBM ont produit rapidement des anticorps mais ceux traités avec ALM n'ont pas réponde. L'étude par l'immunofluorescence indirecte et l'immunoferritine a montré que l'anticorps réagit avec la bordure en brosse du tube proximal du rein de chien adulte normal. L'anticorps réagit aussi avec les membranes de surface de certains autres épithélium d'absorption ou de sécrétion tels ceux de la vésicule biliaire de l'intestin grêle, de l'épididyme ou de la glande lacrymale. L'anticorps a de l'affinité pour la maltase membranaire sans modifier son activité catalytique. Il ne paraît pas avoir d'affinité pour la phosphatase alcaline membranaire ou pour le site de liaison à haute affinité pour la phlorizine présent dans BBM. L'électrophorèse en polyacrylamide de BBM solubilisé montre environ 37 bandes de protéines et quatre glycoprotéines. Nous concluons que la cellule tubulaire proximale est immunologiquement polarisée en ce qui concerne la distribution de protéines antigéniques et que le BBM est fortement antigénique. Les composants antigéniques sont des glycoprotéines de poids moléculaires élevés