Utilización del virus X de la papa como vector de expresión transitoria en plantas

El virus X de la papa (PVX) es el miembro tipo del grupo potexvirus. En este trabajo de Tesis se obtuvo una copia de ADNc completa e infectiva de PVX. Además, se evaluó la capacidad de PVX como vector de expresión transitoria en plantas. Se obtuvieron vectores virales de reemplazo e inserción capaces de expresar el gen bacteriano uid A. En el primer caso, se reemplazó el gen de la cápside (CP) por el gen marcador, y se evaluó en experimentos de complementación. Sólo se observó actividad de la enzima β-glucuronidasa (GUS) en ensayos de co-inoculación con viriones de PVX purificados. La actividad de GUS estuvo restringida a pocas células en la hoja inoculada. En el segundo caso, se obtuvo un vector de inserción donde el gen uíd A se expresó a partir de una duplicación del promotor subgenómico de CP y se observó actividad de GUS en las hojas inoculadas. También se obtuvo y evaluó un vector de inserción para expresar el gen del factor de crecimiento epidermal humano. Finalmente, se obtuvieron herramientas necesarias para implementar un sistema de trans-complementación entre plantas transgénicas que expresaban la replicasa de PVX y construcciones derivadas de PVX defectivas en la replicación