Participación de factores de crecimiento y fibronectina en la regulación del desarrollo folicular en mamíferos

Esta tesis está dirigida al estudio de factores regulatorios, de producción y acción local, que controlan el desarrollo del folículo ovárico en mamíferos. El modelo que se escogió es el bovino, del cual se obtuvo fluido folicular de folículos en diversos estadios de desarrollo así como también células de la granulosa con las que se establecieron cultivos primarios. Alternativamente se utilizó la línea celular BGC-1, obtenida a partir de cultivos primarios de granulosa bovina, la cual fue validada en términos de su respuesta proliferativa y productos de secreción característicos de los estadios inmaduros de desarrollo folicular. Se determinó que la actividad mitogénica presente en medios condicionados de células BGC-1 es debida a la presencia de fibronectina (FN). La expresión de ésta fue estimulada por la acción del factor de crecimiento transformante β (TGF-β), el cual a su vez alteró el patrón de “splicing” del ARNm de FN, estimulando la inclusión del exón ED-I (FN-ED-I+). Posteriormente, se determinó por Western blot que existen importantes cambios en la expresión de FN-ED-I+ a lo largo del desarrollo folicular, los cuales están correlacionados inversamente con la actividad gonadotrófica en cada folículo, evaluada a través de los niveles de estradiol en fluído folicular. Asimismo, el tratamiento de cultivos primarios con AMPc, mediador de la acción de gonadotrofinas, reduce sensiblemente la expresión de FN-ED-I+. Finalmente se determinó que el dominio ED-I confiere propiedades de factor de crecimiento a la FN, ya que un péptido recombinante de esta región promovió la proliferación de cultivos de células BGC-1. Estos resultados indican que la FN juega un papel importante en el desarrollo folicular, regulando la proliferación dc las células de la granulosa en las primeras etapas del desarrollo folicular