Avaliação in vitro da eficácia de soluções experimentais de quitosana fosforilada, em PH neutro e alcalino, no controle da erosão dentinária

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2016.O objetivo desse estudo foi avaliar, in vitro, o efeito anti-erosivo de soluções experimentais de quitosana fosforilada, em pH neutro e alcalino, em dentina bovina. Quitosana de baixo peso molecular foi modificada numa reação com ácido metasulfônico e oxicloreto de fósforo para a obtenção de quitosana com 30% de fosforilação. Blocos de dentina radicular bovina (8 x 4 x 2 mm) foram polidos com lixas dágua: 400, 600, 1200 e diamante em suspensão: 6 µm, 3 µm, 1 µm e 0,25 µm. Os espécimes de dentina foram aleatoriamente distribuídos nos seguintes grupos (n = 8): 1- Sem tratamento (controle negativo); 2- Solução tampão PBS, pH = 7,4 (controle negativo); 3- Solução de AmF/NaF/SnCl2 (fluoreto de amina/fluoreto de sódio/cloreto de estanho - controle positivo), pH = 4,5; 4- Solução de quitosana 0,5%, pH = 7,6; 5- Solução de quitosana fosforilada 0,5%, pH = 7,0; 6- Solução de quitosana fosforilada 0,5%, pH = 11,0. Os espécimes foram submetidos durante 5 dias ao ciclo des-remineralização (des-re) seguido de tratamento: ácido cítrico 0,5%, pH = 2,3 (2 min, 6x/dia); solução remineralizadora, pH = 6,5 (30 min, após o desafio ácido e após o tratamento com as soluções controles e experimentais/12h durante a noite); tratamento (2 min, 6x/dia). A perda de estrutura de dentina foi mensurada por perfilometria e a superfície da dentina exposta ao ciclo des-re foi analisada através de microscopia eletrônica de varredura (MEV). A maior perda de dentina foi encontrada no grupo sem tratamento (26,45±2,22 µm), seguido pelo grupo tratado com PBS (24,74±2,15 µm), quitosana (21,60±3,65 µm), quitosana fosforilada alcalina (17,82±2,18 µm), quitosana fosforilada neutra (17,76±3,30 µm) e AmF/NaF/SnCl2 (8,63±1,94 µm). Em comparação com o grupo sem tratamento, o grupo tratado com AmF/NaF/SnCl2 apresentou maior redução na perda de dentina (67%), seguido pelos dois grupos tratados com quitosana fosforilada (33%), quitosana (18%) e PBS (6%). A microscopia revelou preservação da integridade das fibras colágenas nos grupos tratados com AmF/NaF/SnCl2 e quitosana fosforilada alcalina. Soluções experimentais de quitosana fosforilada apresentaram efeito limitado na redução da perda dentinária, quando comparadas com a solução fluoretada, porém, o possível efeito sobre a manutenção da integridade das fibras colágenas torna este polímero promissor na prevenção e tratamento da erosão em dentina.Abstract : The aim of this study was to evaluate, in vitro, the anti-erosive effect of phosphorylated chitosan experimental solutions, neutral and alkaline pH, in bovine dentin. Low molecular weight chitosan was modified in a reaction with metasulphonic acid and phosphorous oxychloride to obtain chitosan with 30% of phosphorylation. Bovine root dentin blocks (8 x 4 x 2 mm) were polished with grids: 400, 600, 1200 and diamond suspension: 6, 3, 1 and 0.25 micrometers. The dentin specimens were randomly distributed in the following groups (n = 8): 1. No treatment (negative control); 2- Phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4 (negative control); 3- Amine fluoride, sodium fluoride and stannous chloride (AmF / NaF / SnCl2 - positive control), pH = 4.5; 4- Chitosan (0,5%), pH = 7.6; 5- Phosphorylated chitosan (0,5%), pH = 7.0; 6- Phosphorylated chitosan (0,5%), pH = 11.0. The specimens were subjected to the experimental cycle for 5 days followed by treatment: citric acid 0.5%, pH = 2.3 (2 min, 6x / day); remineralizing solution, pH 6.5 (30 min, after acid challenge and after treatment / 12h overnight); treatment (2 min, 6x / day). The loss of dentin was measured by profilometry and the surface of dentin was analyzed by scanning electron microscopy (SEM). The largest loss of dentin was found in the group without treatment (26.45 ± 2.22 µm) followed by PBS-treated group (24.74 ± 2.15 µm), chitosan (21.60 ± 3.65 µm), phosphorylated chitosan alkaline (17.82 ± 2.18 µm), phosphorylated chitosan neutral (17.76 ± 3.30 µm) and AmF / NaF / SnCl2 (8.63 ± 1.94 µm). In comparison with the untreated group, group treated with AmF / NaF / SnCl2 exhibited a greater reduction in the loss of dentin (67%), followed by the two groups treated with phosphorylated chitosan (33%), chitosan (18%) and PBS (6%). SEM showed preservation of the integrity of the collagen fibers in the groups treated with AmF / NaF / SnCl2 and phosphorylated chitosan alkaline. Experimental solutions of phosphorylated chitosan had limited effect in reducing dentin loss in comparison with fluoride solution, however, the possible effect on maintaining the integrity of collagen fibers makes this promising polymer in the prevention and treatment of erosion in dentin