Establishment and molecular characterisation of high grade serous epithelial ovarian cancer cell lines

Das Ovarialkarzinom, oder auch Eierstockkrebs, welches jährlich rund 225 000 Fälle betrifft, zeigt eine erschreckende Todeszahl von zirka 140 000. Das epitheliale Ovarialkarzinom ist der Typ von Eierstockkrebs der jährlich die höchste Todesrate aufweist. 75% der Patientinnen erkranken am hochgradigen serösen Ovarialkarzinom bei dem fast alle Patientinnen eine Mutation im TP53 Gen aufweisen. Da es keine effizienten, spezifischen Tests gibt und der Verlauf der Krankheit bei Eierstockkrebs sehr asymptomatisch ist, kann die Krankheit in den meisten Fällen erst in einem sehr fortgeschrittenen Stadium diagnostiziert werden. Unter den Standardtherapien zählen zum einen, der operative Eingriff, bei welchem versucht wird den kompletten Tumor zu entfernen und zum anderen, die platinhaltige Chemotherapie. Obwohl es vielen Patientinnen nach dem Eingriff wieder gut geht, erleiden einige die Wiederkehr eines resistenten Ovarialkarzinoms, welches oft tödlich endet. Dies erklärt auch die niedrige 5 Jahres Überlebenschance beim hochgradigen serösen Ovarialkarzinom von etwa 30%. Eine kleine Untergruppe an Tumorzellen im Primärtumor könnte für die Wiederkehr und die Chemo-resistenz der Zellen verantwortlich sein. Um die molekularen Mechanismen dieser Krankheit zu untersuchen und dieser Hypothese nachzugehen, werden dringend experimentelle Modelle benötigt. Das Ziel dieser wissenschaftlichen Arbeit war es, primäre Zellkulturen zu etablieren, welche als repräsentativ für das hochgradig seröse Ovarialkarzinom gelten und für die Forschung am Ovarialkarzinom unerlässlich sind. Aszites und Tumorgewebe von insgesamt 24 Patientinnen wurde als Primärzellkultur angesetzt. TP53 Mutationen im Tumorgewebe wurden mittels Hefe-Assay detektiert. Spezifischen TP53 Mutationen wurden als Tumormarker für die Kontrolle und die Identifizierung in der Zellkultur eingesetzt. 13 primäre Zellkulturen und Zelllinien von insgesamt 11 Patientinnen konnten etabliert werden. Mittels TP53 Mutations- und Proteinexpressionsanalysen wurden zwei unterschiedliche Zelltypen identifiziert. Der erste Typ von Zellen stellt die Tumorzellen aus dem Tumorgewebe dar. Die zweite Zellpopulation stellt mit einer repräsentativen Wahrscheinlichkeit einen Typ dar, der von Mesothelzellen aus vom Peritoneum abstammen. Zusammenfassend wurden primäre Zellkulturen und Zelllinien vom hochgradig serösen Ovarialkarzinom etabliert, welche in Zukunft als wichtige Modelle in der Forschung an dieser schweren Krankheit beitragen können.Ovarian cancer has an incidence of about 225000 women worldwide and causes approximately 140000 deaths annually. Epithelial ovarian cancer is the most lethal type of ovarian cancer. 75% of the patients present high grade serous ovarian cancers, almost all of them harbouring a TP53 gene mutation. Due to the lack of efficient screenings and the asymptomatic course of the disease, many patients are diagnosed at an advanced stage of disease. Standard treatment includes surgery, in which tumour mass is removed maximally, and platinum-based chemotherapy. Even though most patients can achieve complete remission, most of them relapse with resistant disease and eventually die. The 5-year survival rate of high grade serous ovarian cancer patients is below 30%. It has been suggested that a small sub-population of cancer cells within the primary tumour is responsible for the recurrent disease and chemoresistance. In order to study the molecular mechanisms, experimental models are urgently needed. The objective of this work is to establish primary cell culture and cell lines, which can represent the high grade serous ovarian cancer and be used for ovarian cancer research. Ascites and tumour tissues from a total of 24 patients were set up as primary culture. TP53 mutations in tumour tissues were determined using a functional yeast assay. The specific TP53 mutation was used as a tumour marker to monitor the cell culture. 13 primary cell culture and cell lines could be established from 11 patients. Analyses of TP53 mutation and protein expression revealed two different cell types. While one type represents the tumour cells in tumour tissue, the other one might be derived from mesothelial cells in the peritoneal cavity. In conclusion, primary cell culture and cell lines representing high grade serous ovarian cancer have been established, which can serve as models to further study this disease