Análisis citoquímico, fluorimétrico y citofisiológico del derivado porfirinico TMPP

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid. Facultad de Ciencias. Departamento de Citología e Histología. Fecha de lectura: 1985El TMPP es un derivado porfirínico de carácter básico, que puede utilizarse como fluorocromo para la demostración de diversas estructuras celulares y tisulares. En el presente trabajo se ha realizado un estudio sobre las características fluorescentes que presentan dichas estructuras celulares, principalmente la cromatina, asi como de las modificaciones que resultan en su fluorescencia después de aplicar distintos tratamientos experimentales previos o posteriores a la tinción. De forma paralela se ha llevado a cabo un estudio de las propiedades espectrofluorimétricas del TMPP en solución y en presencia de determinados solventes y macromoléculas, con el fin de establecer comparaciones del comportamiento del fluorocromo en su interacción con distintos sustratos biológicos. Tanto los estudios citoquímicos como fluorimétricos, han revelado que el TMPP se une al DNA preferentemente por uniones de tipo intercalante, y de forma secundaria por uniones de carácter electro^ tático . Asimismo, se han estudiado los efectos citofisiológicos de este derivado porfirínico, resultando ser un potente inductor de daño citogenético, al provocar anomalías mitóticas y micronúcleos, así como un incremento en la frecuencia de intercambios entre cromátidas hermanas. Por otra parte, hemos podido comprobar que el TMPP es un agente fotosensible ya que la acción combinada de dicho derivado porfirínico y de irradiación se traduce en un incremento de la frecuencia de intercambios entre cromátidas hermanas sobre los controles tratados pero no irradiados