Effect of low power laser in the human pulp fibroblasts proliferation and in the activity of metalloproteinases 2 and 9 in vitro

The aim of the present study was to evaluate the gelatinase activity (MMP-2 and 9), and proliferation of human pulp fibroblasts in vitro, after irradiation with a low level diode laser (780nm). The activity was evaluated with zymography and the proliferation rate was obtained through growth curves made in SigmaPlot (8.0), after the counting in Neubauer chamber.in light microscope. Cells used to zimography were cultived in DMEM, 10% fetal bovine serum and incubated at 37ºC in atmosphere of 5% CO2 and 95% air, in 100% humidity. Cells used to proliferation rate were cultivated in nutritional deficit (5% SFB). Groups to zymography and cell proliferation were determined: zymography - Z1 = not irradiated, Z2 = 3J/cm2 e Z3 = 6J/cm2, cell proliferation: L1 = not irradiated, L2 = 3J/cm2 e L3 = 6J/cm2. The counting was made after 2, 4 and 6 days. Assays were performed in triplicate. The zymography showed that the MMP-2 activity was major with MMP-9, and, Z2 e Z3 produced a higher activity than MMP-2, when compared to Z1. Results of the zymography and proliferation test were compared by either ANOVA complemented by Tukey´s test. The level of significance was 5% (p<0,05). Statistical analysis demonstrate difference between the groups in different days. The L3 obtained higher proliferation in the finish of the six days. L2 demonstrated higher growth than L1. Irradiated fibroblasts with the low power laser expressed a higher amount of MMP-2 activity and 6J/cm2 produced a higher proliferation rate in the initial daysO objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade das gelatinases (MMP-2 e MMP-9), e a proliferação de fibroblastos pulpares humanos in vitro, após a irradiação com um diodo laser de baixa de baixa potência (780nm). A atividade foi avaliada com zimografia e as taxas de proliferação e contagem celular foram obtidas através de curvas de crescimento feitas com o software SigmaPlot (8.0), após a contagem em câmara de Neubauer ao microscópio óptico. As células usadas para a zimografia foram cultivvadas em DMEM, com SFB a 10% e incubadas a 37ºC em atmosfera de 5% CO2 e 95% de ar, em 100% de umidade. Já, as células usadas para a taxa de proliferação e contagem celular foram cultivadas em déficit nutricional (5% SFB). Os grupos para zimmografia e para a contagem e taxa de proliferação foram determinados: a) zimografia - Z1 = sem irradiação, Z2 = 3J/cm2 e Z3 = 6J/cm2 e b) proliferação e contagem celular - L1 = sem irradiação, L2 = 3J/cm2 e L3 = 6J/cm2. A contagem celular foi realizada em após 2, 4 e 6 dias. Os ensaios foram realizados em triplicata. A zimografia mostrou que a ativiidade da MMP-2 foi maior que a MMP-9, e Z2 e Z3 produziram uma grande atividade, quando comparados ao rupo Z1. Os resultados da zimografia e dos testes de contagem e proliferação celular foram comparados por análise de variância (ANOVA) e complementado pelo teste Tukey. O nível de significância utilizado foi de % (p