至今在拟南芥中尚未发现复杂生物碱,但是其基因组测序则表明有35个以上基因可编码(S)-去甲乌药碱合成酶(NCS).本研究首先以经过生化表征、机理清楚的来自罂粟、日本黄连、黄唐松草和花菱草的NCS为参考,与拟南芥中注释的NCS进行了广泛的生物信息学分析与比对,从中选择5个AtNCS为目的基因,设计特异性引物;从拟南芥中提取总RNA,一步法RT-PCR克隆得到上述基因;通过TA克隆将上述基因转入pGM-T载体,筛选、酶切及PCR鉴定,DNA测序验证它们的核酸序列;将测序验证的AtNCS基因经过PCR扩增、质粒构建、转入Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达和蛋白纯化;在整体细胞、细胞裂解液、细胞裂解液上清和纯化蛋白共4个层次进行了AtNCS酶功能表征,未发现目标产物或新产物的生成;上述基因的具体功能还有待进一步研究. 更多还
RNA表观遗传修饰N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物信使RNA(mRNA)上存在的最为广泛的中间化学修饰.它在哺乳动物中存在较为广泛,证实m6A为mRNA上的动态可逆化修饰,它由甲基转移酶复合物(编...
利用冠醚(crown ether)分子上的氧原子與二苄基銨離子(dibenzyl- ammonium ion)上[O…H—N+]的氫鍵作用力,可促使此兩種分子形成準車輪烷類構形的錯合物,此類分子辨識系...
本研究利用Tacora、Ansofie及Fame等三品種非洲菊,分別萃取其花蕾期 (開始轉色期)、半開期及全開期之植物組織DNA及RNA,針對控制進入類黃素代謝途徑、控制黃酮 (flavones) 合...
拟南芥(Arabidopsis thaliana)是生物学研究中广泛使用的模式生物.到目前为止,没有证据表明拟南芥中存在复杂生物碱,但对其基因组数据的生物信息学分析表明,有很多基因与萜类吲哚生物碱(T...
为研究凯氏拟小球藻(Parachlorellakessleri)糖代谢分子机制,本研究采用RT-PCR和RACE技术从凯氏拟小球藻中克隆了己糖激酶基因CkeHK(GenBankID:AHF54566)...
商陆种子的7kD多肽被鉴定为一种抗真菌多肽,命名为PAFP(pokeweed antifungal protein)。它抑制Trichoderma viride, Fusatium及其它一些病原真菌的...
近年,ミドリムシ等から発見された光活性化cAMP合成酵素は,細胞機能を光操作できる次世代の生命科学実験ツールとして期待されている.筆者らは,好温性アメーバの一種であるネグレリア グルベリのタンパク質N...
甜菊(SteviarebaudianaBertoni)是一种新型糖源作物,其糖苷具有高甜度、低热能、易溶解、耐热、稳定等特点,已成为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源植物,广泛用于食品、医药等行业。但...
在前期克隆获得LpP5CS基因的全长cDNA序列基础上,采用PCR扩增技术对多年生黑麦草脯氨酸合成酶基因P5CS的定点突变体系进行了探讨,并运用农杆菌转化技术对突变后的基因进行了功能验证。根据突变位点...
2011-2013年度科学研究費助成事業(基盤研究(C))研究成果報告書 課題番号:23570058 研究代表者:内海俊樹(鹿児島大学・理工学研究科・教授)マメ科植物による根粒菌のリポ多糖(LPS)認...
生长素是最重要的植物激素之一,参与了植物生长发育的各个方面.植物体内游离的IAA是生长素的主要活性形式,在IAA甲基转移酶1(IAMT1)的作用下,IAA可以转变为IAA甲酯(MeIAA).MeIAA...
随着越来越多基因组全序列的测定完成,基因组的研究进入了功能研究阶段.功能基因组的研究需要把大量基因连入不同载体,传统的酶切连接构建载体的方法不能满足这种大规模克隆的需要.Gateway技术是一种高效的...
本文从拟南芥中克隆到基因Atlg30210的全长读码框.多序列比对结果表明,在推导的氨基酸水平上,该基因编码的蛋白含有特征性的TCP保守结构域,与已知的玉米、金鱼草和水稻的TCP家族基因中都存在显著性...
克隆并分析几种植物中白藜芦醇合酶基因(resveratrol synthase,RS)的片段.根据GenBank中已知的RS基因保守序列设计引物,采用PCR技术从葡萄科植物(蛇葡萄、三叶爬山虎、五叶爬...
目的 为探索利用分子生物学技术培育新型药用植物的新途径,将外源的白藜芦醇合酶(RS)基因导入到丹参中表达,以改善或增加丹参的效用.方法 根据已公布的核苷酸序列,利用引物悬挂延伸法,经过3次扩增,最终从...
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