Experimental poisoning by Tetrapterys multiglandulosa (Malpighiaceae) in sheep

Cardiac fibrosis was observed in a calf showing dullness, weakening and respiratory insufficiency in a farm in the state of São Paulo, where cardiac insufficiency, abortion and nervous signs in cattle were associated with the ingestion of Tetrapterys multiglandulosa. The objectives of this paper were to determine the susceptibility of sheep to the intoxication by T. multiglandulosa, to describe the clinical and pathological characteristics of the intoxication, and to evaluate the possibility of using sheep as an experimental species for toxicological studies with this plant. In a previous experiment to determine the toxicity of T. multiglandulosa to be used in sheep, the green plant was given to a steer at the dose of 22g per kg body weight (g/kg/bw), daily, during 9 days. After 9 days the steer showed nervous signs, and on the 12thday was euthanatized. No gross lesions were observed at necropsy. Status spongiosus was observed on the deeper layers of the cerebral cortex and subcortical white matter. Six male sheep were divided in three groups of two sheep each. Group 1 (Sheep 1 and 2) received daily doses of 6 g/kg/bw of the dry plant, during 30 days; Group 2 (Sheep 3 and 4) received daily doses of 3 g/kg/bw, during 60 days; and Group 3 was the control group. Sheep 1 was euthanatized 30 days after the start of the ingestion. Only cardiac arrhythmia was observed clinically, and no lesions were observed at necropsy. Sheep 2, 3 and 4 had also cardiac arrhythmia from day 9, 12 and 18, respectively. From day 52 they started to show depression, reluctance to move and incoordination. Clinical signs got gradually worst and the sheep were euthanatized on days 60, 70 and 80, when clinical signs were marked, and the animals will die at any moment. Hydrothorax, hydropericardium, ascites, nutmeg appearance of the liver and hard whitish myocardium, mainly in the interventricular septum and left ventricle, were observed at necropsy. Histologically, the heart of Sheep 2, 3 and 4 had areas of fibrosis associated with mononuclear cell infiltration. No lesions were found in the heart of Sheep 1. The 4 treated sheep had status spongiosus in different areas of the cerebrum and brain stem, mainly of the deep layers of the cerebral cortex and subcortical white matter. Status spongiosus were also observed in the cerebellar white matter and cervical medulla. In the later the vacuolization was moderate in the white matter and mild in the grey matter. Status spongiosus were mild in Sheep 1 and moderate to severe in Sheep 2, 3 and 4. On electron microscopy it was observed that the status spongiosus is due to an intramyelinic edema. No gross or histologic lesions were observed on the two control sheep, which were euthanized on day 80 after the start of the experiment.Em uma propriedade no município de Roseira Velha, São Paulo, com histórico de doença cardíaca, abortos e sinais nervosos em bovinos, associados à ingestão de Tetrapterys multiglandulosa, foi observada fibrose cardíaca em um bezerro de uma semana de idade que apresentava apatia, fraqueza e insuficiência respiratória. Os objetivos desse trabalho foram determinar se a espécie ovina é sensível à intoxicação por T. multiglandulosa, descrever as alterações clínicas e patológicas da intoxicação e avaliar a utilização dessa espécie como modelo experimental para a intoxicação. Para determinar a toxicidade de T. multiglandulosa a ser utilizada em ovinos, foi realizado um experimento prévio em um bovino, sendo administrado 22g por kg de peso vivo (g/kg/pv) da planta verde durante 9 dias. Após 9 dias de ingestão o animal apresentou sinais nervosos e no 12º dia foi eutanasiado. Na necropsia não foram observadas lesões. No estudo histológico observou-se vacuolização (status spongiosus, espongiose) da camada profunda da substância cinzenta do córtex cerebral e da substância branca subcortical. Para a reprodução da enfermidade em ovinos foram utilizados 6 ovinos, machos, divididos em 3 grupos de 2 animais cada. Os Ovinos 1 e 2 do Grupo 1 receberam doses diárias de 6 g/kg/pv da planta seca por um período de 30 dias; os Ovinos 3 e 4 do Grupo 2 receberam doses diárias de 3 g/kg/pv por um período de 60 dias; e os Ovinos 5 e 6 do Grupo 3 serviram como controle. O Ovino 1 foi sacrificado aos 30 dias de administração da planta. Apresentou somente arritmia cardíaca e não foram observadas lesões significativas na necropsia. Os Ovinos 2, 3 e 4 apresentaram arritmia a partir dos dias 9, 12 e 18 do início do experimento, respectivamente. A partir do 52º dia iniciaram a apresentar depressão, relutância em locomover-se e incoordenação. Esses sinais foram se agravando e os ovinos foram sacrificados, com sinais clínicos acentuados, aos 60, 70 e 80 dias após o início do experimento, respectivamente. Na necropsia apresentaram hidropericárdio, ascite, hidrotórax, fígado em noz moscada e miocárdio endurecido e esbranquiçado, especialmente no septo interventricular e ventrículo esquerdo. Microscopicamente, o coração dos Ovinos 2, 3 e 4 apresentava áreas de fibrose associadas a infiltrado inflamatório mononuclear. Não foram observadas lesões cardíacas no coração do Ovino 1. No cérebro e tronco encefálico de todos os animais que receberam a planta observou-se espongiose, principalmente na camada profunda da córtex e da substância branca subcortical. No cerebelo observou-se espongiose da substância branca e na medula cervical havia espongiose da substância branca e espongiose discreta da substância cinzenta. Essa lesões eram discretas no Ovino 1 e moderadas a acentuadas nos Ovinos 2, 3 e 4. Na microscopia eletrônica da substância branca cerebelar foi observado que o status spongiosus observado na microscopia de luz é causado por edema intramielínico. Os dois ovinos do grupo controle, sacrificados aos 80 dias após o início do experimento, não apresentaram sinais clínicos nem lesões macroscópicas ou histológicas significativas