A natural terpenoid with immunomodulatory and antiangiogenic activities as a potential antiherpetic agent

La Queratitis Estromal Herpética (QH) se produce por una respuesta inflamatoria que ocurre en el ojo humano como secuela de la infección causada por el virus Herpes simplex tipo 1 (HSV-1), siendo la primera causa epidemiológica de ceguera infecciosa en los países desarrollados. Uno de eventos característicos de la evolución de la QH es la neovascularización. Para limitar la progresión de la enfermedad se utilizan los corticosteroides y el aciclovir (ACV) que mitigan la inflamación e impiden la diseminación viral, respectivamente. Teniendo en cuenta los efectos adversos generados por los corticoides y el fenómeno de emergencia de mutantes del HSV-1 resistentes al ACV, se pone de relieve la necesidad de encontrar nuevas drogas antivirales. La búsqueda no sólo debería estar orientada a la obtención de compuestos que interfieran con alguna etapa del ciclo de multiplicación viral, sino que también contemple el hecho que la droga en cuestión interfiera con alguna señal intracelular, produciendo un efecto final tanto antiviral como inmunomodulador. En nuestro laboratorio se ha demostrado que un extracto parcialmente purificado obtenido a partir de hojas de Melia azedarach L., denominado meliacina (MA), inhibe la multiplicación de virus pertenecientes a distintas familias, en condiciones in vitro y en ausencia de citotoxicidad. In vivo, MA inhibe la incidencia y la severidad de la QH murina, lo cual sugiere que ejercería un efecto antiinflamatorio, además de actuar como antiviral. Uno de los principios antivirales presentes en dichos extractos es el tetranortriterpenoide 1-cinamoil-3,11-dihidroximeliacarpina (CDM), que inhibe la multiplicación del HSV-1 in vitro, basifica los endosomas, y afecta el transporte de las glicoproteínas virales a la membrana plasmática. En el presente trabajo de tesis se investigó el mecanismo de acción antiviral e inmunomodulador de CDM en células epiteliales del tejido ocular y en células inflamatorias, así como también el efecto antiangiogénico del compuesto en células endoteliales. Así fue posible avanzar en la comprensión de mecanismos moleculares y celulares que podrían explicar el efecto curativo de MA en la enfermedad ocular inducida por HSV-1 en ratón.Ocular Herpes Simplex virus type 1 (HSV-1) infection may result in a inflammatory lesion in the eye termed Herpetic stromal keratitis (HSK). Such HSK lesions represent the commonest infectious cause of blindness in developed countries. Neovascularization stands for a major step in HSK pathogenesis. The current standard of care includes topical corticosteroids and acyclovir (ACV). Corticosteroids are used to combat the inflammatory component of the disease, and the antiviral prevents viral disemination. Considering the adverse effects caused by steroids and the phenomenon of emergence of mutant HSV-1 strains resistant to ACV, highlights the need for new antiviral drugs. The search should not only be aimed at obtaining compounds that interfere with some stage of viral multiplication cycle, but should also affect an intracellular signal, gathering together both antiviral and immunomodulatory effects. Our laboratory has demonstrated that a partially purified extract obtained from leaves of Melia azedarach L., called meliacine (MA), inhibits the multiplication of viruses belonging to different families in the absence of cytotoxicity, in vitro. In vivo, MA inhibits the incidence and severity of the murine HSK, suggesting that it exerts an anti- inflammatory effect in addition to its antiviral action. One of the main antiviral principles obtained in these extracts is the 1-cinnamoyl-3,11-dihydroxymeliacarpin (CDM), which inhibits HSV-1 multiplication in vitro provokes the basification of the endosomal vesicles, and affects the trafficking of viral glycoproteins. In this thesis we investigated the antiviral and immunomodulatory activities of CDM in epithelial cells of ocular tissue and inflammatory cells, as well as its antiangiogenic effect in endothelial cells. Thus, it was possible to advance in the understanding of the molecular and cellular mechanisms involved in the healing effect of MA in the ocular HSV-1 infection in mice.Fil:Bueno, Carlos Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina