探討APOBEC3B及APOBEC3G對人類肝癌細胞株Hep3B腫瘤抑制的影響

[[abstract]]此研究首先將 APOBEC3B (apolipoprotein B mRNA-editing catalytic polypeptide- like 3B) 及 APOBEC3G (apolipoprotein B mRNA-editing catalytic polypeptide- like 3G) 基因轉移至 pLKO_AS2.puro vector (pLV) 載體中，並轉染入人類肝癌細胞株 Hep3B ，轉染後使用抗體接有 FITC 染色並用螢光顯微鏡觀察，確認 pLV-APOBEC3B 及 pLV-APOBEC3G 在細胞中過度表現的位置，實驗結果顯示 pLV-APOBEC3B 過度表現位置位於細胞核，而 pLV-APOBEC3G 過度表現位置位於細胞質中。為了評估 APOBEC3B 及 APOBEC3G 對於腫瘤抑制的情形，使用 MTS 測試分別轉染 pLV 、 pLV-APOBEC3B 、 pLV-APOBEC3G 的 Hep3B ，轉染後48小時結果發現細胞存活率分別為88%、57%、48%，結果顯示 APOBEC3B 及 APOBEC3G 具有抑制 Hep3B 肝癌細胞株。另外，當 Hep3B 細胞生長至70-80%時，以實驗用微量塑膠吸管尖端於細胞盤上劃一直線，觀察細胞癒合情形發現在72小時，控制組及轉染 pLV 組為100%完全癒合，而分別轉染 pLV-APOBEC3B 及 pLV-APOBEC3G 過度表現的 Hep3B ，細胞癒合程度為48%及43%，結果顯示， APOBEC3B 及 APOBEC3G 具有抑制 Hep3B 細胞生長的能力。最後，轉染 pLV-APOBEC3B 及 pLV-APOBEC3G 於 Hep3B 過度表現後，加入抗腫瘤藥物 Mitomycin-C ， MTS 測試結果顯示， Hep3B 加入3x10-2 mg/ml (90nM) 的 Mitomycin-C 後48小時細胞存活率為49%，結果亦顯示轉染 pLV-APOBEC3B 及 pLV-APOBEC3G 並加入3x10-2 mg/ml的 Mitomycin-C ，細胞存活率分別為27%及32%。綜合實驗結果顯示，APOBEC3B及APOBEC3G具有抑制Hep3B肝癌細胞株的生長能力