Caracterización de los genes de histonas en el género Mytilus y evolución molecular de la familia multigénica H1

[Resumen] INTRODUCCIÓN Las histonas son un grupo de proteínas básicas de pequeño tamaño presentes en las células eucariotas, involucradas en el empaquetamiento del ADN formando la fibra de cromatina. Existen cinco familias que se clasifican en histonas del core (H2A, H2B, H3, H4) e histonas linker (H1). Su origen evolutivo parece remontarse a organismos procariotas, y aunque es obvio que la heterogeneidad funcional en eucariotas debe venir dictada por mecanismos complejos, hasta la fecha su evolución ha sido explicada como un proceso concertado. El conocimiento actual es limitado en cuanto a patrones de organización, expresión y evolución de estos genes en invertebrados, especialmente en el caso de genes H1. Para mejorar el conocimiento acerca de las histonas se han propuesto tres objetivos principales: Caracterizar la unidad repetitiva de histonas en el molusco bivalvo Mytilus galloprovincialis, estudiar las secuencias de ADN de los cinco genes de histonas en cuatro especies adicionales (M. californianus, M. chilensis, M. edulis y M. trossulus), y analizar los mecanismos involucrados en la evolución de los genes H1. RESULTADOS Se diseñaron primers para amplificar mediante PCR la refión codificante de cada una de las cinco histonas en especies del género Mytilus, los cuáles permitieron obtener sondas para buscar genes de histonas en una genoteca de M. galloprovincialis, caracterizándose la unidad repetitiva como H4 mayor que , menor que H2B, H2A mayor que , H3 mayor que , H1 mayor que , 5S mayor que , 5S mayor que . Las regiones promotoras mostraron la presencia de elementos reguladores típicos (cajas TATA, posiciones CAP y cajas CAAT). En el caso de H1 también se identificaron elementos H1 box-like y elementos H4 box, mientras que las regiones 3' terminales UTR mostraron secuencias tallo-bucle, seguidas por un elemento rico en purinas y al menos una señal de poli(A). La caracterización de la unidad en M. galloprovincial