Produção de prostaglandinas pelo endométrio canino ao longo do ciclo éstrico e a sua relação com a transcrição de genes dos toll-like receptors

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaO endométrio canino constitui a primeira linha de defesa contra infecções bacterianas ascendentes, sendo os toll-like receptors (TLRs) elementos chave no reconhecimento de agentes patogénicos por parte do sistema imunitário inato. Um dos objectivos deste trabalho consistiu na avaliação da expressão de mRNA dos TLRs no endométrio da cadela ao longo do ciclo éstrico. Detectou-se a expressão de mRNA dos TLRs 1-7 e 9 por RT-PCR, o que demonstra a sua capacidade de reconhecimento de uma grande variedade de ligandos através da activação via TLRs. Verificou-se ainda que a transcrição dos TLRs 2 e 4 se encontra significativamente diminuída no início de diestro, o que pode justificar a maior susceptibilidade do útero à infecção por E. coli nesta fase. Pelo contrário, no final de diestro, a transcrição de genes destes receptores demonstrou estar bastante aumentada. O outro objectivo consistiu na determinação da produção de PGE2 e de PGF2α por explantes do endométrio de diferentes fases do ciclo éstrico, na ausência e na presença de estímulos como o lipopolissacarídeo (LPS) e o ácido lipoteicóico (LTA). A estimulação com LPS e LTA levou a um aumento da produção de ambas as prostaglandinas em relação ao tecido não estimulado. No entanto, este aumento foi significativamente superior nos explantes de final de diestro, quando comparado com os de fase folicular, diestro e anestro. Estes resultados sugerem, em suma, a capacidade de activação dos TLRs 2 e 4 em modelos de cultura de explantes de endométrio de cadela, resultando na produção de mediadores capazes de regular a resposta inflamatória local.ABSTRACT - PROSTAGLANDINS PRODUCTION BY CANINE ENDOMETRIUM THROUGH THE OESTRUS CYCLE AND ITS RELATIONSHIP WITH TOLL-LIKE RECEPTORS GENES TRANSCRIPTION - The canine endometrium is the first line of defense against ascending bacterial infections and the toll-like receptors (TLRs) are key elements in pathogen recognition by innate immune system. The first aim of this study was to evaluate the mRNA expression of TLRs in the endometrium of the bitch throughout the oestrus cycle. Gene transcription of TLRs 1-7 and 9 was detected by RT-PCR, which demonstrates its ability to recognize a wide range of ligands through TLR activation. It was also found that gene transcription of TLRs 2 and 4 are downregulated in early diestrus, which might explain the higher susceptibility to uterine infection, induced by Escherichia coli, in this stage. On the other hand, in late diestrus the mRNA expression of these receptors has proven to be greatly increased. The other objective was to assess the production of PGE2 and PGF2α by endometrial explants in different stages of the oestrus cycle, in the absence and presence of stimuli like lipopolysaccharide (LPS) and lipoteichoic acid (LTA). Stimulation with LPS and LTA led to an increased production of both prostaglandins compared with that observed in unstimulated tissues. However, this increase was significantly higher in explants from late diestrus, when compared with those in follicular phase, diestrus and anestrus. These results suggest, briefly, the activation of TLRs 2 and 4 in canine endometrial explants culture models, which result in the mediators production that may further regulate local inflammatory response