Expressão proteica hepática em ovinos Merinos Australianos, Dorper e Damara sujeitos a perda de peso sazonal

Mestrado em Engenharia Zootécnica - Produção Animal - Instituto Superior de Agronomia / Faculdade de Medicina VeterináriaSeasonal Weight Loss (SWL) poses a serious limitation to animal production in Tropical and Mediterranean climates, strongly conditioning animal production in these areas. The study of the physiological and molecular mechanisms by which domestic animal breeds respond to SWL is of capital interest with important implications in animal selection schemes. Recently, the use of proteomic approaches has allowed a much greater insight on the molecular mechanisms at the protein level in a vast array of physiological mechanisms including those underlying SWL. The objective of this study is to determine differential protein expression in the liver levels of three breeds of sheep that show different tolerance levels to SWL: Australian Merino (susceptible), Damara (tolerant) and Dorper (intermediate). Liver samples were obtained from both control and underfed, weight‐loosing animals of the three breeds. Total protein was extracted and quantified. SDS‐page gels were run and the 2D electrophoresis technique was optimized. The objective is to obtain large slab 2D gels for analysis using Amersham’s Imagemaster platinum software. After the analysis spots were excised for identification with MALD‐TOF/TOF MS/MS. The expression of heat shock protein (predicted), 3‐hydroxyacyl‐CoA dehydrogenase type‐2, 2 Hydroxysteroid (17‐beta) dehydrogenase 4, 4‐ hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, Triosephosphate isomerase, Carbamoyl Phosphate Synthetase I, mitochondria isoform1 seem associated to weight loss sensitivity.--------------------------------A Perda de Peso Sazonal (PPS) é uma séria limitação para a produção animal em climas Tropicais e mediterrânicos, condicionando a produção animal nestas regiões. O estudo dos mecanismos fisiológicos e moleculares pelos quais as raças domésticas respondem à PPS é de grande interesse, com importantes implicações em programas de selecção animal. Recentemente, a utilização da proteómica tem permitido um maior aprofundamento dos mecanismos moleculares ao nível proteico, num vasto leque de mecanismos fisiológicos incluindo os que estão na base da PPS. O objectivo deste estudo é determinar a expressão proteica diferencial ao nível do fígado de três raças ovinas que se consideram a priori como tendo diferentes níveis de tolerância à PPS: Merino Australiano (susceptível), Damara (tolerante) e Dorper (intermédio). As amostras de fígado foram obtidas de animais dos grupos controlo e sub‐alimentados das três raças. A proteína total foi extraída e quantificada e géis foram corridos usando‐se uma técnica de 2D‐E optimizada. Após análise de imagens foram excisados spots para identificação por MALDITOF/ TOF. A expressão das proteínas: heat shock protein (predicted), 3‐hydroxyacyl‐CoA dehydrogenase type‐2, 2 Hydroxysteroid (17‐beta) dehydrogenase 4, 4‐ hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, Triosephosphate isomerase , Carbamoyl Phosphate Synthetase I, mitochondria isoform1 ,parecem estar associadas a sensibilidade à perda de peso