Rastreio de mycobacterium avium subsp. paratuberculosis na doença de Crohn

Trabalho apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências FarmacêuticasO possível envolvimento de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) na etiologia da doença de Crohn tem gerado muita controvérsia ao longo dos anos. A utilização de métodos de identificação por PCR reportou a detecção de MAP em pacientes com doença de Crohn, mas também em indivíduos sem doença. Outros estudos reportam resultados negativos para ambos os grupos. O objectivo deste trabalho foi verificar se na população de doentes estudada se encontrava uma associação entre presença de MAP e DC. Efectuou-se detecção de MAP em 29 amostras de sangue periférico: 11 amostras de pacientes com doença de Crohn e 18 amostras de indivíduos controlos. As amostras foram analisadas por desagregação das células e extracção do DNA tendo sido, de seguida, utilizada a técnica de PCR-nested para amplificação de parte da sequência de inserção IS900, específica do MAP e presente em elevado número de cópias. A análise dos produtos amplificados foi efectuada por electroforese em gel de agarose. DNA de MAP foi detectado em 9 dos 11 pacientes (82%) e 4 dos 18 controlos (22%), o que sugere uma associação entre MAP e DC na população estudada