Contribution à la standardisation de la méthode de dosage des anticorps anti-ß2 glycoproteine I

Au début nous avons purifié l'antigène ß2-glycoprotéine I (ß2GPI) avec des méthodes chromatographiques qui ont permis d'obtenir un antigène ni contaminé ni dénaturé. Ensuite nous avons analysé des principales variables du test ELISA pour la détermination des anticorps anti-ß2GPI IgG. Nous avons investigué les variables suivantes: les "coatings" (PBS à pH neutre, tampon carbonate à pH basique), les microplaques (7 types), les tampons de blocages (absence de tampon, PBS + albumine sérique bovine, PBS + gélatine), les tampons de dilution (6 avec différentes forces ioniques), les antisérums anti-immunoglobulines humaines (5 de firmes différentes) et des antigènes ß2GPI préparés avec des méthodes différentes par 4 centres. On peut conclure que certaines variables comme les microplaques, les tampons de dilution et les antisérums anti-immunoglobulines humaines sont capables d'influencer les résultats du test ELISA pour la détermination des aß2GPI IgG et que les préparations antigéniques peuvent corréler de diverses manières avec la clinique