Terapia intravenosa con células mesenquimales en la fase aguda del daño cerebral: estudio experimental en un modelo animal de trauma craneal pediátrico

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Pediatría. Fecha de lectura: 26-11-2014Objetivo: Estudiar si la terapia intravenosa con células madre mesenquimales en la fase aguda del daño cerebral, es segura y consigue mejorar la recuperación motora, sensitiva y cognitiva a medio plazo, en ratas jóvenes que sufren un traumatismo craneoencefálico grave. También se realiza estudio de la distribución y supervivencia de estas células en el tejido cerebral. Métodos: Se aíslan MSC de la grasa peritoneal de ratas sanas, se expanden en cultivo, y se marcan con proteína G fluorescente (GFP). Se realiza un traumatismo craneoencefálico con un modelo de impacto cortical controlado mediante caída de un peso a 30 ratas Sprague-Dawley hembra de 150 -200 g de peso. Los animales se dividen en dos grupos control (control simple y otro que recibe PBS) y un grupo tratamiento. A los animales del grupo tratamiento se les administran a través de la vena de la cola 4x106 MSC, en dos bolos de 2x106, a las 24 y 48 horas del trauma. Se realizan pruebas motoras, sensitivas y cognitivas (test de Rogers, steacky tape test y Rotarod) semanalmente durante un mes para evaluar la recuperación funcional. Se realizan técnicas de inmunohistoquímica y citometría a las 24 horas y 28 días. Resultados: No se observan efectos adversos durante o después de la administración de las MSC. A las 48 horas de la infusión IV se encuentran MSC en los cortes histológicos en la zona perilesional por técnicas de fluorescencia directa, vimentina y marcaje con anticuerpos antiGFP. Por citometría se encuentra un mayor porcentaje de MSC (CD29+, CD90+, GFP+) en el hemisferio lesionado que en contralateral a las 48 horas y al mes de la infusión. Al mes de la lesión los tres grupos de experimentación alcanzan el mismo estado funcional, pero la recuperación de los déficits sensitivos y motores se inicia antes y el porcentaje de recuperación es mayor en el grupo tratamiento. Conclusiones: Las células madre mesenquimales infundidas por vía intravenosa no tienen efectos adversos a corto plazo, alcanzan la zona perilesional y permanecen en ella produciendo una mayor y más rápida recuperación sensitivomotora en ratas jóvenes con traumatismo craneoencefálico grave. Esta terapia celular podría ser considerada para los pacientes que sufren de daño cerebral traumático