IgA nephropathy podocyte immunohistochemical expression in different forms of clinical evolution and histological tissue reaction patterns

Introdução: a nefropatia por IgA (NIgA) primária é uma glomerulonefrite (GN) proliferativa mesangial primeiramente descrita pelos patologistas franceses Berger e Hinglais em 1968, hoje considerada a glomerulopatia primária mais comum no mundo. A NIgA é definida histologicamente através da demonstração pela microscopia de imunofluorescência de depósitos mesangiais de imunoglobulinas, com predomínio de IgA, com manifestações histológicas sob microscopia de luz e evoluções clínicas variáveis. Nela, a proteinúria, um dos principais fatores de risco para a perda da função renal, ocorre principalmente através de lesão podocitária. Apesar de ser doença com manifestações iniciais predominantemente mesangiais, a proteinúria provavelmente é consequência de lesão dos podócitos. Objetivos: este estudo tem como objetivo identificar possíveis associações entre a imunoexpressão dos marcadores podocitários CD10, GLEPP-1, synaptopodin e WT1, além dos marcadores de transição epitélio-mesênquima desmin e vimentin com: (1) as diferentes formas de apresentação clínica, níveis de proteinúria e de função renal e (2) as diferentes categorias histopatológicas da Classificação de Oxford para a NIgA. Metodologia: 95 pacientes com nefropatia da IgA foram avaliados para a imunoexpressão das proteínas CD10, desmin, GLEPP1, synaptopodin, vimentin e WT1 em suas biópsias renais. A expressão destas proteínas foi mensurada de forma qualitativa e quantitativa, através do software de patologia digital para o cálculo da razão de imunoexpressão (relação de positividade de pixels), em comparação com as alterações histopatológicas pela classificação de Oxford e com a apresentação clínica, níveis de proteinúria e de função renal. A análise estatística entre os diferentes grupos foi realizada através do Teste de Spearman para as análises entre variáveis contínuas não paramétricas e Mann-Whitney para as análises entre variáveis contínuas e categóricas. Resultados: a média da razão de imunoexpressão de WT1, no grupo com proteinúria menor ou igual que 700mg/24 h foi de 18% ± 9,58% e no grupo com proteinúria maior que 700 mg/24 h foi de 8% ±5,87% (p<0,01). A média da razão de imunoexpressão de synaptopodin em amostras sem a formação de crescentes celulares e/ou fibrocelulares (padrão Oxford C0) foi de 22,06% ±7,81% e em amostras com a formação de crescentes (padrão Oxford C1 ou C2) foi de 35,5% ±7,94% (p<0,01). Conclusão: a avaliação por métodos digitais da imunoexpressão de WT1 identificou uma redução da imunoexpressão em pacientes com piores níveis de proteinúria. Além disso, encontramos correlação entre a imunoexpressão de synaptopodin e o desenvolvimento de crescentes celulares e/ou fibrocelulares.Introduction: primary IgA nephropathy (IgA) is a mesangial proliferative glomerulonephritis (GN), first described by the French pathologists Berger and Hinglais in 1968 and is now considered the most common primary glomerulopathy in the world. IgAN is defined histologically through the demonstration by immunofluorescence microscopy of mesangial deposits of immunoglobulins, with a predominance of IgA, with histological manifestations under light microscopy and variable clinical evolution. In it, proteinuria, one of the main risk factors for renal function decline, occurs mainly through podocyte injury. Despite being a disease with predominantly mesangial initial manifestations, proteinuria is probably a consequence of podocyte injury. Methodology: samples of kidney biopsies from 95 patients with IgA nephropathy were submitted to CD10, desmin, GLEPP1, synaptopodin, vimentin, and WT1 immunohistochemical expression evaluation. The intensity of expression of these proteins, qualitatively and quantitatively, using the digital pathology software to calculate the immunoexpression ratio (pixel positivity ratio), was compared with the histopathological alterations using the Oxford classification and with the clinical presentation, levels of proteinuria, and renal function. Statistical analysis between the different groups used the Spearman test for analysis between non-parametric continuous variables and the Mann-Whitney test for analysis between continuous and categorical variables. Results: the average WT1 immunoexpression ratio in the group with proteinuria less than or equal to 700mg/24 h was 18% ± 9.58%, and in the group with proteinuria greater than 700 mg/24h was 8% ± 5.87 % (p<0.01). The mean immunoexpression ratio of synaptopodin in samples without the formation of cellular or fibrocellular crescents (Oxford C0) was 22.06% ±7.81%, and in samples with crescent formation (Oxford C1 or C2 ) was 35.5% ±7.94% (p