Crystalline L-ornithine transaminase from Corynebacterium sepedonicum : Identification of reaction product(Department of Agricultural Chemistry)

Corynebacterium sepedonicum (IFO 3306)のL-オルニチントランスアミナーゼ(結晶標品)のL-オルニチンに対する作用特性を明らかにした。酵素反応によりL-オルニチンに由来する反応生成物は, イオン交換クロマトグラフィー及び高圧濾紙電気泳動などの分析結果から⊿^1-ピロリン-5-カルボン酸であることが確められた。一方, α-ケトグルタル酸からはL-グルタミン酸が生成された。これらのことから, 本酵素はL-オルニチンの末端アミノ基とα-ケトグルタル酸との間のアミノ基転移反応を触媒し, L-グルタミン酸とグルタミン酸-γ-セミアルデヒドを生成するが, 後者は非酵素的に脱水閉環して⊿^1-ピロリン-5-カルボン酸に変化することが明らかになった。The reaction product of L-ornithine with crystalline L-ornithine transaminase from Corynebacterium sepedonicum (IFO 3306) was investigated. The formation of ⊿^1-pyrroline-5-carboxylate was shown by amino acid analysis and paper electrophoresis of the reaction product. These findings revealed that the terminal amino group of L-ornithine is transaminated to yield ⊿^1-pyrroline-5-carboxylate. Therefore, glutamate-γ-semialdehyde is produced directly from L-ornithine. Glutamate formed was identified as the L-enantiomer with L-glutamate dehydrogenase