Síntesis y estudio fisicoquímico de péptidos biológicamente activos

Tesis presentada en 2003 en la Universitat de Barcelona para la obtención del título de doctor.En el presente trabajo, se han seleccionado la laminina como proteína que puede actuar como vector. Dentro de su secuencia se seleccionó de acuerdo con la literatura un fragmento peptídico (SIKVAV). El objetivo del trabajo es incorporar esta secuencia peptídica que es reconocida por células tumorales, a liposomas que tienen encapsulada doxorrubicina. Se han sintetizado tres secuencias peptídicas: LAM 10-1: EEGYSIKVAV-NH2 LAM 10A-1: GESIKVAVS-NH2 LAM 10A-3 St-GESIKVAVS-NH2 Se han purificado y caracterizado por cromatografía líquida de alta presión (HPLC), Análisis de aminoácidos y espectropmetría de masas. Ya puros y conocido su rendimiento, se ha pasado a su estudio fisicoquímico, utilizando como modelos de membrana monocapas y bicapas. En monocapas se ha estudiado su actividad superficial, se han realizado sus isotermas de compresión y su miscibilidad con DPPC (componente mayoritario de la membrana celular). Se han realizado también las cinéticas de penetración área constante utilizando el mismo fosfolípido e inyectando concentraciones de los péptidos en la subfase del mismo orden. La interacción de las secuencias peptídicas con bicapas, se ha estudiado determinado los cambios conformacionales provocados por los lípidos en los péptidos y por otro lado estudiando los cambios en la ordenación de los lípidos producidos por la presencia de péptidos. Las sondas fluorescentes son buenos indicadores de la aparición de alteraciones producidas por la inserción de las moléculas en la bicapa lipídica, pudiendo afectar la microviscosidad del medio. Como sondas fluorescentes se han empleado ANS y DPH.Peer reviewe