Penambahan Pepton pada Pertumbuhan Miselium Lentinula Edodes serta Efektivitas Ekstraknya terhadap Kematian Sel Hepg2 melalui Uji Sitotoksik dan Apoptosis

Kanker hati termasuk dalam kanker yang umum dijumpai pada organ hati dan menempati urutan keenam kasus kanker tertinggi di dunia. Tindakan medis yang telah diberikan kepada penderita kanker saat ini yaitu pembedahan, radioterapi dan kemoterapi. Namun ketiga terapi tersebut khususnya kemoterapi memiliki efek samping yang berdampak buruk pada kualitas hidup pasien. Salah satu solusi untuk mengurangi efek samping tersebut yaitu dengan menggunakan bahan alami, diantaranya jamur Lentinula edodes. L. edodes, yang dikenal sebagai Jamur Shiitake, merupakan salah satu jamur pangan yang mampu menghasilkan senyawa bioaktif yang bermanfaat bagi kesehatan. Salah satu peran dari senyawa bioaktif tersebut yaitu sebagai senyawa antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi pepton dan waktu inkubasi terbaik terhadap pertumbuhan miselium jamur L. edodes, mengetahui efek sitotoksik dan apoptosis ekstrak L. edodes terhadap sel kanker hati (HepG2) secara in vitro dan mengetahui kandungan senyawa bioaktif dari L. edodes. Penelitian dilakukan dalam dua tahap. Tahap pertama menggunakan metode eksperimen Rancangan Acak Lengkap pola faktorial (RAL faktorial) dengan dua faktor. Faktor pertama adalah kosentrasi pepton yang terdiri atas tiga taraf, yaitu 1, 2 dan 3 gram per L, dan faktor kedua adalah waktu inkubasi yang teridiri atas enam taraf, yaitu 5, 10, 15, 20, 25 dan 30 hari sehingga diperoleh 18 kombinasi perlakuan. Setiap kombinasi perlakuan diulang sebanyak tiga kali sehingga diperoleh 54 unit percobaan. Tahap kedua yaitu uji sitotoksik dan apoptosis yang dilakukan secara in vitro. Uji sitotoksik menggunakan metode MTT assay. Uji apoptosis menggunakan metode flowcytometry. Uji senyawa bioaktif menggunakan KLT dan GC-MS. Data bobot kering miselium yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA pada tingkat kepercayaan 95% dan dilanjutkan uji DMRT. Data dari uji sitotoksisitas (absorbansi) diubah menjadi persentase hidup sel dan dihitung nilai IC50 menggunakan analisis regresi linier. Uji apoptosis, KLT dan GC-MS dianalisis secara deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi pepton terbaik yaitu 3 g/L dengan masa inkubasi 30 hari yang menghasilkan bobot kering miselium rata-rata 0,2967 g/L. Efek sitotoksik dari ekstrak jamur L. edodes yang terbaik yaitu ekstrak kloroform tubuh buah jamur Shiitake dengan nilai IC50 399,05 µg/ml. Pemberian ekstrak L. edodes dapat menyebabkan apoptosis sel HepG2. Jamur L. edodes mengandung senyawa metabolit sekunder golongan alkaloid, terpenoid dan flavonoid serta senyawa asam palmitat, Z-Citral dan valencen yang merupakan senyawa bioaktif antikanker