A new format ELISA for the detection of HBsAg

Biotecnología Aplicada 1998;15:250-253 A new format ELISA for the detection of HBsAg Rolando Ochoa Azze Code Number: BA98041 Size of Files: Text: 39K Graphics: Line drawings (gif) - 22K ABSTRACT A new ELISA has been standardised, using two monoclonal antibodies directed against HBsAg. The sheep anti-HBsAg/alkaline phosphatase conjugate and the positive control were dehydrated at 37C for 18 h and 35% relative humidity. Sucrose was used as stabiliser with an optimum concentration of 125 mg/mL. The one step ELISA is carried out by adding a washing solution into control wells and samples into the remainder. Sensitivity and specificity were 100%. Discrimination value was 0.22 U/mL. Stability was studied for coating antibodies, dehydrated conjugate and the dehydrated positive control. The stability during their use was over 80% at 150 days and storage stability at 2-8 C was over 80% a year after. Keywords: conjugate stability, HBsAg, HBsAg stability, new format ELISA, one step ELISA RESUMEN Se estandarizó un ELISA en el que se usan dos anticuerpos monoclonales de captura anti-HBsAg de diferente especificidad. El conjugado anti-HBsAg (ovino)/fosfatasa alcalina y el control positivo se presentan desecados en los pocillos mediante incubación por 18 h a 37C y humedad de 35%. La concentración óptima de sacarosa empleada como elemento estabilizador fue de 125 mg/mL. Para el ELISA en un paso de reacción se requiere tan sólo añadir solución de lavado en los pocillos correspondientes a los controles, las muestras se adicionan en los pocillos restantes. La sensibilidad y especificidad fueron del 100%. El valor de discriminación de 0,22 U/mL. La estabilidad de uso y en anaquel (2-8C), fue superior al 80% a los 150 días y al año respectivamente, tanto para los anticuerpos de recubrimiento como para el conjugado y el control positivo desecados. Palabras claves: ELISA de nuevo formato, ELISA en un paso, estabilidad de conjugados, estabilidad del HBsAg Copyright 1998 Elfos Scientia