NUCELLAR EMBRYO CULTURE OF CITRUS SINENSIS L. AND CITRUS LIMON L.

African Crop Science Journal, Vol. 8. No. 2 June 2000 NUCELLAR EMBRYO CULTURE OF CITRUS SINENSIS L. AND CITRUS LIMON L. S. D. OBUKOSIA, KIMANI WAITHAKA Code Number: cs00011 ABSTRACT Nucellar tissue cultures of polyembryonic Citrus sinensis cultivar Valencia Late and Citrus limon cultivar Rough Lemon produced somatic embryos within 60 days of culture on Murashige and Skoog (MS) basal medium supplemented with 0.4 g l-1 of filter-sterilised casein hydrolysate or 10% coconut water. Embryos that were separated and subcultured in MS media containing casein hydrolysate or coconut water but without hormones, first developed roots within 4 to 8 months and then shoots within 6 to 9 months of in vitro culture. Plantlets were transplanted to soil from 7 to 9 months after initiation. Callus-like tissue consisting of pseudobulbils was observed after 4 to 5 months from the time of initiation. Pseudobulbils developed into visible embryos with multiple cotyledons when subcultured into MS media containing casein hydrolysate or 10% coconut water after 19 to 27 days of in vitro culture. These embryos produced plantlets in which roots developed after 6 to 10 months and shoots formed after 8 to 11 months from the time of initiation. Key Words: Citrus, nucellar embryo culture, somatic embryogenesis résumé Les cultures des tissus nucellulaires du cultivar Valencia Late et du cultivar Citrus lémon Rough Lemon ont produit des embryons somatiques dans 60 jours de culture sur le milieu à base de Murashige et Skoog (MS) ajouté de 0.4 g l-1 de filtre dhydrolysate de caséine stérilisé ou 10% deau de noix de coco. Les embryons qui étaient séparés et repiqués dans le milieu MS contenant lhydrolysate de caséine ou leau de noix de coco mais sans hormones, ont dabord développé des racines dans 4 à 8 mois et puis des pousses dans 6 à 9 mois de culture in vitro. Les plantules ont été transplantées dans le sol depuis 7 à 9 mois après initiation. Les callus, tissus constitués des pseudobulbes ont été observés après 4 à 5 mois à partir du temps dinitiation. Les pseudobulbes se sont développés en embryons visibles avec de multiples cotylédons quand ils étaient repiqués dans le milieu MS contenant lhydrolysate de caséine ou 10% deau de noix de coco après 19 à 27 jours de culture in vitro. Ces embryons ont produit des plantules dans lesquelles les racines se sont développées après 6 à 10 mois et des pousses formées après 8 à 11 mois à partir du temps dinitiation. Mots Clés: Citrus, culture dembryos nucellulaire, embryogenèse somatique Copyright 2000, African Crop Science Societ