Detection of Enzymatic Activity of Src Kinase Immobilized on Magnetic Particles

Diplomová práce se zabývá imobilizací proteinkinázy na magnetický nosič, fosforylací proteinů na tyrosinu a její detekcí. Fosforylace byla provedena u dvou proteinů - alfa-synukleinu a myelinovém bazickém proteinu pomocí volné i imobilizované Src kinázy. Detekce byla provedena metodami Western blotu pomocí dendrimeru pIMAGO a specifických protilátek proti fosforylovanému tyrosinu a hmotnostní spektrometrie. Stabilita imobilizované Src kinázy byla sledována pomocí Src peptidu s analýzou hmotnostní spektrometrií.The thesis deals with the immobilization of protein kinase on a magnetic carrier, the phosphorylation of proteins on tyrosine and its detection. Phosphorylation was performed on two proteins - alpha-synuclein and myelin basic protein using both soluble and immobilized Src kinase. Detection was performed by Western blot methods using pIMAGO dendrimer and specific antibodies against phosphorylated tyrosine and mass spectrometry. The stability of immobilized Src kinase was monitored using Src peptide and mass spectrometry analysis.Fakulta chemicko-technologická1. Prezentace výsledků diplomové práce. 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce. 3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové práci.Dokončená práce s úspěšnou obhajobo