Efeitos da desnutrição materna no período de aleitamento na porção cortical e trabecular da epífise proximal do fêmur de ratos Wistar adultos

O período de aleitamento é de extrema importância para o correto desenvolvimento do recém-nascido e a qualidade do leite está relacionada à dieta materna. A prevalência da desnutrição materna durante o período de gestação e aleitamento, já prevalente em países subdesenvolvidos, vem aumentando em países desenvolvidos devido a fatores como aumento de consumo de fast-foods e a vontade de perder o peso ganho durante a gravidez de forma rápida. Diversos estudos em animais demonstram alterações estruturais, metabólicas e funcionais nos sistemas muscular, ósseo, articular e nervoso causadas pela desnutrição materna durante o período gestacional e durante o período de aleitamento. Apesar disso, há escassez na literatura a respeito dos efeitos a longo prazo no tecido ósseo da prole cujas progenitoras foram desnutridas durante o aleitamento. O objetivo deste trabalho é verificar as alterações histoquantitativas na epífise proximal do fêmur de ratos Wistar adultos cujas progenitoras foram desnutridas durante a lactação. Após o nascimento da sua prole, 6 ratas progenitoras, de peso e tamanho similares, foram divididas em 03 grupos, cada uma amamentando 6 ratos recém-nascidos, totalizando duas progenitoras e doze ratos em cada grupo. Trinta e seis ratos recém-nascidos foram divididos em três grupos: Os grupos foram nomeados conforme o tipo e quantidade de dieta oferecida para as progenitoras, da seguinte forma: grupo controle, no qual a progenitora recebeu dieta comercial regular contendo 23% de proteína ad libitum; grupo restrição proteica, no qual a progenitora recebeu uma dieta comercial especial preparada, contendo 8% de proteína. Observamos nesse grupo um consumo em quantidade menor da ração proteico, talvez pelo sabor dessa ração, consumindo então menos calorias, o que fez caracterizar esse grupo como restrição proteica e calórica, em quantidades ilimitadas; e o grupo com restrição calórica, cuja progenitora recebeu uma a mesma dieta comercial do grupo controle, contendo 23% de proteína, porém a quantidade foi pareada com a quantidade menor consumida pelo grupo de restrição proteica em quantidades limitadas, ou seja, apesar de ter consumido quantidade normal de proteínas, houve uma restrição de calorias . Todos os grupos tiveram livre acesso a agua. Estas dietas foram administradas somente durante o período de amamentação (21dias). Após o desmame, todos os filhotes foram separados das progenitoras, receberam a mesma dieta que o grupo controle (sem restrições e ad libitum) até os 180 dias de idade. Em seguida, os ratos foram eutanasiados, terço proximal do fêmur foi excisado, descalcificado com ácido nítrico (5%) e preparado histologicamente e incluído em parafina. Análises histomorfométricas foram realizadas em cinco campos histológicos aleatórios distintos de cada rato. Dados relacionados à espessura da cortical, área trabecular, quantidade de osteoblastos e osteoclastos, percentual de lacunas vazias e a área das lacunas foram coletadas. Foi realizado o teste ANOVA seguido pelo teste de Newman-Keuls para fins de comparação multivariada entre os grupos. Observou-se que o fêmur proximal dos grupos restrição proteíco-calórica e restrição calórica possuíam área trabecular média menor, um número maior de lacunas vazias, assim como o tamanho destas, e uma proporção maior de osteoclastos em relação aos osteoblastos. Em suma, a desnutrição materna durante o período de lactação causou efeitos a longo prazo na morfologia femoral de ratos Wistar. Estes efeitos não puderam ser revertidos após a regulação da dieta, caracterizando o conceito de “metabolic imprintig”The breastfeeding period is extremely important for the correct development of the newborn. The quality of the milk is related to the maternal diet. The prevalence of maternal malnutrition during pregnancy and breastfeeding is high in underdeveloped and developed countries due to factors such as increased consumption of fast-foods and the desire to quickly lose the weight gained during pregnancy. Several animal studies demonstrated changes, metabolic and adaptations in muscle, bone, joint and nervous systems caused by maternal malnutrition during the gestational period and during the breastfeeding period. Despite this, there is a paucity in the literature regarding the long-term effects on the bone tissue of the offspring whose dams were malnourished during breastfeeding. The objective of this work is to verify the histoquantitative alterations in the proximal epiphysis of the femur of adult Wistar rats whose mothers were malnourished during lactation. After the birth of their offspring, 6 dams of similar weight and size, were divided into three groups, each one dam paired with six newborn rats, totaling two dams and twelve rats in each group. So, thirty-six newborn rats were divided into three groups named according to the type and amount of diet offered to the dams, as follows: control group, in which the dams received a regular commercial diet containing 23% protein, ad libitum; protein restriction group, in which the dams received a specially prepared commercial diet containing 8% protein. We observed in this group a consumption of a smaller amount of food, perhaps because of the taste of this food and as such, this group consumed less calories, which made this group characterized as protein and caloric restriction, in unlimited quantities; and the calorie-restricted group, whose dams had access to the same commercial diet as the control group, containing 23% protein, but the amount was paired with the smaller amount consumed by the restricted group if protein in limited amounts, despite the normal amount of protein, there was a calorie restriction. All groups had free access to water. These diets were only administered during the breastfeeding period (21 days). After weaning, all pups were separated from their mothers, received the same diet as the control group (unrestricted and ad libitum) until 180 days of age. Afterwards, the rats were euthanized, the proximal third of the femur was excised, decalcified with nitric acid (5%) and histologically prepared and embedded in paraffin. Histomorphometric analyzes were performed in five distinct random histological fields of each rat. Data related to cortical thickness, trabecular area, number of osteoblasts and osteoclasts, percentage of empty lacuna and area of gaps were collected. The ANOVA test was performed followed by the Newman-Keuls test for the purpose of multivariate comparison between groups. It was observed that the proximal femur of the protein-calorie restriction and caloric restriction groups had a smaller mean trabecular area, a greater number of empty lacunae, as well as their size, and a greater proportion of osteoclasts in relation to osteoblasts. In summary, maternal malnutrition during the lactation period caused long-term effects on the femoral morphology of Wistar rats. These effects could not be reversed after diet regulation, characterizing the concept of “metabolic imprinting”.59 f