Study of the trypanocidal action of natural products from plants from the Jurubatiba restinga

Desde os tempos antigos, a humanidade tem buscado medicamentos para aliviar a dor e curar várias doenças. Substâncias de origem natural são continuamente estudadas com o objetivo de se ter um tratamento mais seguro e eficaz, e as espécies vegetais têm sido um alvo primordial para a busca de novos agentes terapêuticos. Nesse contexto, um vasto número de produtos naturais tem apresentando atividade contra o Trypanosoma cruzi, um protozoário flagelado causador da Doença de Chagas (DC) que afeta aproximadamente 6 a 7 milhões de pessoas no mundo. O atual tratamento da doença de Chagas (DC) se baseia unicamente em duas substâncias nitroderivadas, o Nifurtimox (Nf) e benzonidazol (Bz), ambas introduzidas na clínica médica há cerca de 50 anos e que têm sido consideradas insatisfatórias principalmente devido à baixa eficácia e alta toxicidade. Neste sentido, existe uma grande urgência pelo desenvolvimento de novas terapias. Diversos grupos de pesquisa têm estudado o potencial de produtos naturais como fonte de novas substâncias ativas contra o parasito. Assim, o principal objetivo deste projeto consistiu na avaliação in vitro de extratos, frações e nanoformulações de plantas oriundas da Restinga de Jurubatiba- RJ sobre o Trypanosoma cruzi. Para isso, realizou-se uma triagem inicial contra formas epimastigotas de 30 produtos naturais derivados de plantas da restinga de Jurubatiba, todos na concentração de 100 ug/mL. A partir deste ensaio, foram identificados 5 produtos naturais que apresentaram atividade tripanocida de boa a moderada tanto em formas epimastigotas quanto em formas tripomastigotas. Também avaliamos a toxicidade frente macrófagos peritoneais, através do ensaio de redução da resazurina e liberação da enzima LDH. Nossos resultados indicaram baixa ou moderada toxicidade para maioria dos produtos testados, com destaque para o EMPFA. Avaliamos também extratos de M. vittoriana e a substância isolada centraterina contra as formas epimastigotas. Os resultados obtidos a partir do ensaio de redução de resazurina indicaram potencial tripanocida para todos os produtos, com especial atenção para centraterina que obteve uma CE50 de 308 ng/mL. No entanto, os ensaios em macrófagos peritoneais revelaram elevado potencial tóxico para todos os extratos e para centraterina. Desse modo, nossos resultados em conjunto demonstram a presença de substâncias com potencial terapêutico em espécies de plantas da restinga de Jurubatiba.Since ancient times, humanity has been looking for medicines to relieve pain and cure various diseases. Substances of natural origin are continuously studied to have a safer and more effective treatment, and plant species have been a prime target for the search for new therapeutic agents. In this context, a vast number of natural products have shown activity against Trypanosoma cruzi, a flagellated protozoan that causes Chagas disease (CD) that affects approximately 6 to 7 million people worldwide. The current treatment for Chagas disease (CD) is based solely on two nitroderivative substances, Nifurtimox (Nf) and benzonidazole (Bz), both introduced in the medical clinics about 50 years ago, and considered unsatisfactory mainly due to their low efficacy and high toxicity. In this sense, there is a great urgency for the development of new therapies. Several research groups have been studying the potential of natural products as a source of new active substances against the parasite. Thus, the main objective of this project was to evaluate in vitro extracts and fractions of plants derived from Restinga de Jurubatiba-RJ over Trypanosoma cruzi. For this, we carried out an initial screening against epimastigote forms of 30 natural products derived from Jurubatiba restinga plants, all at a concentration of 100 µg/mL. From this assay, 5 natural products were identified with good to moderate trypanocidal activity in both epimastigote and trypomastigote forms. We also evaluated the toxicity against peritoneal macrophages by resazurin reduction and LDH enzyme release assay. Our results indicated low or moderate toxicity for most products tested, with special attention to EMPFA. We also evaluated extracts of M. vittoriana and the isolated substance centraterine against epimastigote forms. The results obtained from the resazurin reduction assay indicated trypanocidal potential for all products, with particular attention to centraterina, which obtained an EC50 of 308 ng/mL. However, assays on peritoneal macrophages revealed high toxic potential for all extracts and for centraterine. Therefore, our results together demonstrate the presence of substances with therapeutic potential in Jurubatiba restinga’s plant species.45 f