Aislamiento y diagnóstico de cepas clínicas de enterovirus humanos por métodos convencionales y moleculares

Los enterovirus humanos son la causa más común de meningitis y meningoencefali-tis virales, enfermedades del Sistema Nervioso Central. Además, provocan enferme-dades agudas y crónicas como la poliomielitis, el Síndrome de Mano, Pie y Boca, la cardiomiopatía dilatada, la conjuntivitis hemorrágica y la diabetes mellitus. La vía de transmisión es oral-fecal o respiratoria. Los causantes de conjuntivitis hemorrágica y exantema son transmitidos por contacto directo o indirecto con secreciones ocula-res y con fluidos de las vesículas. El diagnóstico confirmatorio en el laboratorio es importante para el manejo de las infecciones provocadas por estos virus. El objetivo del presente trabajo fue diagnosticar enterovirus humanos por métodos convencio-nales y moleculares, a partir de muestras provenientes de pacientes con cuadro clínico característico. Se procesaron tres tipos de muestras clínicas: líquido cefalo-rraquídeo, heces e hisopado rectal, procedentes de dos pacientes pediátricos con cuadro clínico de síndrome gastroentérico y estado convulsivo y encefalitis, respec-tivamente. Las muestras se procesaron e inocularon en cultivo de células Vero para el aislamiento viral. El diagnóstico molecular se realizó mediante una RT-PCR semi anidada punto final, previa extracción automatizada del ácido nucleico viral. El aisla-miento en el cultivo celular evidenció efecto citopático, indicativo de replicación viral, en las muestras de hisopado rectal y heces, con un 75 y 100% de destrucción de la monocapa celular, respectivamente, a las 72 horas de inoculación. Los cultivos celulares inoculados con líquido cefalorraquídeo no mostraron efecto citopático. El diagnóstico molecular por RT-PCR corroboró la presencia de enterovirus en las muestras de heces e hisopado rectal, así como en el líquido cefalorraquídeo del paciente con estatus convulsivo, coherente con el cuadro clínico mostrado. El em-pleo simultáneo de técnicas convencionales como el aislamiento en cultivo de célu-las y técnicas moleculares como el PCR, fortalecen, complementan y confirman el diagnóstico clínico de las infecciones de etiología enteroviral