Die Rolle von Interferon Gamma im Stroma wärend des Wachstum bzw. der Abstossung vom Tumoren

Das Ziel dieser Arbeit bestand in der Identifizierung des Ursprunges und der Charakterisierung der Rolle von Interferon gamma (IFNg) in der Abstoßung von Tumoren durch geringe Konzentrationen von Cyclophosphamide (Cy). Diese Arbeit zeigt, daß haematopoetische Zellen IFN-g produzieren, welches für die Abstoßung von Tumoren notwendig ist. Mit Hilfe des Cincinnati Zytokin Capture Assay gelang es nachzuweisen, daß die Verabreichung von Cy zu einem stetigem Anstieg von IFN-g in den ersten 4 Tagen führt, welches mit der Regenerierung der durch Cy verursachten Lymphopenie von Mäusen korreliert. Zum ersten Mal konnte durch konfocale Mikroskopie gezeigt werden, daß IFN-g die extrazelluläre Matrix in vivo bindet und deren Komposition beeinflußt. Nach Verabreichung von humanen I125-IFN-g in BALB-c und IFN-g-defizienten Mäusen wurde weniger I125-IFN-g in wild-typ Mäusen gefunden, welches die Konkurrenz zwischen endogenem und exogenem IFN-g für die Bindingsstellen in der extrazellulären Matrix demonstriert. Das antagonistische Peptide MC2 des murinen IFN-g128-135 verhindert die Binding von IFN-g an Matrigel in vitro. In in vivo Experimenten in denen Tumore mit Plasmiden transfiziert wurden, die in der Lage sind MC2 zu sekretieren, waren jedoch nicht eindeutig. Letztlich konnte bestätigt werden, daß IFN-g für die Abstoßung von Tumoren notwendig ist. IFN-g haematopoetischen oder Matrix-gebunden Ursprungs müssen sich dabei nicht ausschließen und könnten möglicher Weise kooperieren, um eine adequate Tumorabstoßung zu vermitteln.The aim of the work was to identify the source and characterise the role of interferon gamma (IFN-g) in low dose cyclophosphamide (Cy) mediated tumour rejection. This work demonstrates that haematopoietic cells are responsible for the production of IFN-g required for complete rejection of the tumour in our model. The Cincinnati Cytokine Capture Assay revealed a steady increase of IFN-g during the first 4 days after Cy treatment and this correlates with the known recovery of mice from Cy induced lymphopenia. For the first time, in vivo, IFN-g has been shown to bind to the extracellular matrix by confocal microscopy, and IFN-g is also capable of influencing matrix deposition. BALB/c mice accumulate reduced levels of human I125-IFN-g compared to their IFN-g knock-out counterparts indicating competition between endogenous and exogenous IFN-g for matrix binding sites. The antagonist peptide from the murine IFN-g128-135 known as MC-2 prevented IFN-g binding to matrigel wells in vitro, however results from the in vivo experiments where tumour cells transfected with plasmids capable of secreting the MC-2 peptide fragment were inconclusive and must be investigated further. Lastly, it is clear that for tumour rejection IFN-g is required, however haematopoietic cell induced and matrix bound IFN-g may not be mutually exclusive and could possibly function together to generate an adequate anti-tumour immune response