Ultravysoko-účinná superkritická fluidní chromatografie / hmotnostní spektrometrie v lipidomické analýze

Ultrahigh-performance supercritical fluid chromatography/mass spectrometry (UHPSFC/MS) is one of the fastest analytical approaches for high-throughput lipidomic analysis covering a wide range of lipid categories and classes. Lipid class separation and lipid species separation are two main separation modes available for the UHPSFC analysis of lipids. The mechanism of the lipid class separation mode is com-parable to that of hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC). The direct comparison of HILIC -ultrahigh-performance liquid chromatography (HILIC-UHPLC) and UHPSFC shows the applicability of UHPSFC/MS for high-throughput quantitation of both nonpolar and polar lipid classes, the faster analysis time, and comparable reproducibility and sensitivity. The retention mechanism of the lipid species separation mode is comparable to reversed-phase UHPLC, but the nonpolar character of supercritical carbon dioxide (scCO(2)) provides a different selectivity compared to that of conventional RP-UHPLC. The introduction of various hyphenation interfaces to MS broadens the applicability and sensitivity range of UHPSFC/MS using scCO(2) as the main component of the mobile phase. The addition of ionic additives (volatile salts, acids, and bases) to the modifier improves the separation of medium to polar lipids. Furthermore, UHPSFC/MS has also a great potential in the chiral separation of lipids, but the field has not yet been fully explored.Ultravysoko-účinná superkritická fluidní chromatografie / hmotnostní spektrometrie (UHPSFC/MS) je jedním z nejrychlejších analytických přístupů pro vysoce výkonnou lipidomickou analýzu pokrývající širokou škálu kategorií a tříd lipidů. Separace tříd lipidů a separace lipidových druhů jsou dva hlavní separační režimy dostupné pro analýzu lipidů UHPSFC. Mechanismus režimu separace lipidů je srovnatelný s mechanismem hydrofilní interakce kapalinová chromatografie (HILIC). Přímé srovnání HILIC-UHPLC a UHPSFC ukazuje použitelnost UHPSFC/MS pro vysoce výkonnou kvantifikaci nepolárních i polárních lipidových tříd, rychlejší dobu analýzy a srovnatelnou reprodukovatelnost a citlivost. Retenční mechanismus režimu separace lipidových druhů je srovnatelný s reverzní fází UHPLC, ale nepolární charakter superkritického oxidu uhličitého (scCO(2)) poskytuje odlišnou selektivitu ve srovnání s konvenčním RP-UHPLC. Zavedení různých rozhraní dělení do MS rozšiřuje použitelnost a rozsah citlivosti UHPSFC/MS s využitím scCO(2) jako hlavní složky mobilní fáze. Přidáním iontových aditiv (těkavých solí, kyselin a zásad) do modifikátoru se zlepšuje separace středních a polárních lipidů. Dále má UHPSFC/MS také velký potenciál v chirální separaci lipidů