Etablierung und Vergleich zweier Methoden zur Mutationsdetektion im Faktor VIII-Gen

Im Rahmen dieser Arbeit etablierte, optimierte und testete ich zwei molekulargenetische Methoden zur Mutationsdetektion im Faktor VIII-Gen. Hierbei handelt es um die SSCP und die ddF. Die SSCP erwies sich als zuverlässige, zeit- und kostensparende Methode, deren Detektionsrate 82% betrug. Demgegenüber zeigte sich die ddF als zeit-, kosten- und arbeitsintensiv, stach aber durch eine bemerkenswert hohe Detektionsrate von 97% hervor. Zur Erfolgskontrolle der optimalen Etablierung wurden Hämophilie A-Patienten mit noch nicht charakterisierten Mutationen untersucht, wobei drei bis dahin unbekannte Mutationen im Faktor VIII-Gen identifiziert werden konnten. Die effektivste Vorgehensweise für die zukünftige Diagnostik bestünde darin, zunächst 80% der Mutationen zügig und kostengünstig durch Einsatz der SSCP zu detektieren. Die verbleibenden 20% der Mutationen könnten anschließend durch den Einsatz der aufwändigeren, aber sehr effektiven ddF ergänzt werden