PCR detection of genetically modified soy bean and maize in food/feed stuffs

Potencijalni štetni efekti koje na zdravlje ljudi i životinja može imati upotreba hrane poreklom od genetički modifikovanih organizama (GMO), kao i eventualni neželjeni efekti koje gajenje genetički modifikovanih biljaka može imati na životnu sredinu, doveli su do potrebe da se u EU strogo ograniči distribucija GMO. Aktima Komisije EU, 49/2000 i 50/2000, propisano je da se prehrambeni artikli proizvedeni od GMO ili koji sadrže GMO, moraju jasno obeležiti. Ovoj obavezi ne podležu oni proizvodi koji sadrže manje od 1% genetički modifikovanog materijala. Prisustvo GMO u hrani za humanu i animalnu upotrebu može biti ustanovljeno bilo detekcijom DNK kojom je urađena modifikacija (PCR metode), bilo detekcijom proteina kodiranog ovom DNK (imunološke metode). U Institutu za molekularnu genetiku i genetičko inženjerstvo standardizovane su kvalitativna i kvantitativna metoda zasnovane na tehnici PCR. Da li uzorak sadrži GMO ili ne određuje se detektovanjem CaMV35S promotora, dok se za detektovanje specifičnih genetičkih modifikacija u RoundUp Ready soji tolerantnoj na herbicid RoundUp i Bt kukuruzu otpornom na insekte, koriste prajmeri dizajnirani iz odgovarajućih specifičnih transgena - gena EPSPS iz A. tumefaciens (za soju) i gena CrylA iz B. thuringiensis (za kukuruz). Eksperimentalno utvrdjena granica osetljivosti metoda je 1pg DNK, što omogućava detektovanje 0,01% GM DNK u testiranom uzorku i odgovara kriterijumima evropskih laboratorija koje su ovlašćene da izdaju sertifikat.Public concern about possible negative health effects due to consumption of GM plants, together with concerns about possible environmental dangers, have led the European Commission to limit strictly the distribution of GM plants in the EU. The EU regulations No 49 and 50/2000 require the food industry to label, as GMO containing, those food products not certified free of transgenic plant material. Foods are considered "clean" and may be left unlabeled, if the GM content does not exceed 1%. The presence of GM in food and feed products can be evaluated by detecting the transgenic DNA (PCR technique), or by detecting proteins derived from this DNA (immunological methods). At the Institute of Molecular Genetics and Genetic Engineering both qualitative and quantitative PCR-based tests are standardized. Commonly used primers are designed from the CaMV35S promoter for the answer yes/no in general GMO screening procedure. Specific modifications, as in herbicide tolerant RoundUp Ready Soybean or insect resistant maize (Bt176 corn), are identified by primers designed from specific genes e.g. the EPSPS - gene from A.tumefaciens (for soybean) and the CrylA gene from B.thuringiensis (for maize). The experimentally determined detection limit is 1pg, which allows detection of O,01% GM DNA in test-samples and meets criteria prescribed for the EU laboratories accredited to issue a certificate