Cryopreservation of in vitro produced and biopsied bovine embryos

Aujourd’hui, la cryoconservation de l’embryon bovin est primordiale pour assurer sa préservation dans l’attente de sa valorisation. Cependant, la qualité des embryons produits in vitro est inférieure à celle de ceux produits in vivo ne permettant pas l’obtention de taux de gestation équivalents. Lors du processus de congélation, les membranes, majoritairement composées de lipides, subissent des contraintes physiques et chimiques pouvant aboutir à une lyse des cellules embryonnaires. Ainsi, afin d’améliorer la qualité des embryons bovins produits in vitro et biopsiés, deux tâches ont été menées en parallèle : (1) l’acquisition de nouvelles connaissances scientifiques sur le profil lipidique des embryons produits in vitro et la modulation de ce profil par l’ajout d’acides gras de type oméga 3 avec pour objectifs d’augmenter la fluidité membranaire et de diminuer la cryosensibilité des embryons; (2) l’acquisition de nouvelles connaissances scientifiques sur l’intérêt du CRYO3, dans la formulation de milieux de cryoconservation synthétiques, pour la cryoconservation des embryons bovins. Ces travaux ont permis de mettre en évidence que le profil lipidique des embryons est fortement impacté par le processus de production in vitro et les protocoles de cryoconservation. La modulation du profil lipidique par l’ajout d’oméga 3 n’impacte pas le développement et la cryosurvie des embryons mais semble bénéfique à l’obtention d’embryons de meilleure qualité. Enfin, le CRYO3 est un candidat intéressant permettant de se passer des milieux habituels, contenant des dérivés de produits animaux, tout en améliorant la cryosurvie des embryons.Today, cryopreservation of bovine embryo is essential to ensure its preservation while awaiting their valuation. However, the quality of the in vitro produced embryos is inferior to those in vivo produced, which does not allow to obtained equivalent gestation rate. During the freezing process, the membranes, mainly composed of lipids, undergo physical and chemical stress which can lead to lysis of embryonic cells. In this way, in order to improve the quality of in vitro produced bovine embryos, two tasks were carried out in parallel: (1) The acquisition of new scientific knowledge on the lipid profile of in vitro produced bovine embryos and the modulation of the lipid profile by the addition of omega 3 fatty acid with the objectives of increasing membrane fluidity and reducing the embryo cryosensitivity; (2) the acquisition of new scientific knowledge on the interest of CRYO3, in the formulation of synthetic media, for the cryopreservation of bovine embryos in vitro produced and biopsied. This work has demonstrated that the lipid profile of embryos is strongly impacted by the in vitro development and cryopreservation protocol. Modulating the lipid profile by adding omega 3 does not impact the development and cryosurvival of embryos but appears to be beneficial for improving embryonic quality. Finally, CRYO3 is an interesting candidate, making it possible to dispense with the usual media, containing derivatives of animal products, while improving the cryosurvival of the embryos