L'interaction entre le suppresseur de l’ARN interférence du BNYVV et sa cible DRB4 est modulée par un ARN viral non codant

In plants, RNA silencing (RNAi) is an antiviral defense mechanism involving DCL proteins and their associated DRB proteins. To overcome RNAi, phytoviruses express viral suppressors RNA silencing, or VSRs. Beet yellow necrotic vein virus (BNYVV) RNA1 and RNA2 are sufficient to ensure infection on Nicotiana benthamiana and non-coding RNA3 (RNA3nc), derived from genomic RNA3 degradation by XRN4, is necessary for viral long distance movement on natural Beta host. The p14 protein is the VSR expressed by the BNYVV, essential for systemic movement. The p14BA2 mutant is unable to provide this movement but is complemented by the accumulation of ncRNA3. In order to unravel p14 silencing suppression mechanism, its potential partners were searched in N. benthamiana. The DRB4 protein has thus been identified. Our studies show an interaction between p14BA2 and NbDRB4, restricted to nucleoli where both proteins co-localize, while the wild-type p14 protein is relocated and excluded from the nucleolus. The p14BA2-NbDRB4 interaction is specifically abolished by nuclear accumulation of ncRNA3.L’ARN interférence est un mécanisme de défense antivirale chez les plantes qui fait intervenir les protéines DCL et leurs cofacteurs, les protéines DRB. Pour le contourner, les phytovirus expriment des suppresseurs de l’ARN interférence, ou VSR. Les ARN1 et ARN2 du virus des nervures jaunes et nécrotiques de la betterave (BNYVV) suffisent à assurer l’infection sur Nicotiana benthamiana et l’ARN3 non-codant (ARN3nc), dérivé de l’ARN3, est nécessaire au mouvement viral à longue distance sur l’hôte naturel du genre Beta. La protéine p14 est le VSR du BNYVV, essentielle au mouvement systémique. Le mutant p14BA2 est incapable d’assurer ce mouvement mais est complémenté par l’accumulation de l’ARN3nc. Pour préciser le mode d’action de p14, ses partenaires ont été recherchés dans N. benthamiana. La protéine DRB4 a ainsi été identifiée. Ces travaux montrent une interaction entre p14BA2 et NbDRB4, restreinte aux nucléoles où les deux protéines co-localisent, tandis que la protéine p14 sauvage est relocalisée et exclue du nucléole. L’interaction p14BA2-NbDRB4 est spécifiquement abolie par l’accumulation nucléaire de l’ARN3nc